6.2 中药学（H28） - 国家自然科学基金委员会医学科学部

筛 选 新 体 系 的 建 立项 目 批 准 号 : 30873388项 目 负 责 人 : 李 会 军依 托 单 位 : 中 国 药 科 大 学中 药 发 挥 疗 效 的 物 质 基 础 是 存 在 于 其 中 的 活 性 成 分 。 从 中 药 复 杂 体 系 中 筛 选 出 活 性 成 分的 方 法 学 研 究 是 中 药 现 代 化 的 关 键 科 学 问 题 之 一 。 传 统 的 ― 植 物 化 学 分 离 - 药 理 活 性 评 价 ‖ 模式 工 作 量 大 、 周 期 长 , 不 能 满 足 快 速 筛 选 的 需 要 ;― 组 合 化 学 - 高 通 量 筛 选 ‖ 模 式 往 往 需 要 经过 复 杂 的 样 品 预 处 理 , 且 假 阳 性 率 偏 高 , 不 适 合 于 中 药 等 复 杂 体 系 的 筛 选 ;― 血 清 药 理 学 -血 清 药 化 学 ‖ 模 式 , 由 于 中 药 成 分 在 血 清 中 含 量 低 微 、 血 清 中 内 源 性 物 质 干 扰 等 使 分 析 、 筛选 难 度 加 大 ;― 生 物 色 谱 ‖ 模 式 由 于 生 物 色 谱 柱 制 备 困 难 、 色 谱 分 离 条 件 特 殊 , 使 得 该 方 法 的推 广 应 用 受 到 限 制 。 因 此 , 建 立 一 种 更 加 快 速 、 高 效 、 能 适 用 于 复 杂 体 系 的 中 药 活 性 成 分 筛选 的 新 方 法 , 显 得 非 常 必 要 。 本 研 究 设 计 了 一 种 全 新 的 在 线 二 维 涡 流 色 谱 - 质 谱 联 用 技 术 ,即 将 中 药 提 取 物 与 靶 标 酶 孵 育 后 , 经 二 维 涡 流 色 谱 分 离 得 到 酶 - 活 性 成 分 复 合 物 , 复 合 物 经在 线 解 离 后 导 入 液 相 色 谱 - 质 谱 系 统 进 行 活 性 成 分 的 鉴 定 。 将 该 筛 选 体 系 应 用 于 由 27 个 贝 母甾 体 生 物 碱 组 成 的 天 然 产 物 库 中 胆 碱 酯 酶 抑 制 剂 的 筛 选 , 筛 选 结 果 证 实 了 该 方 法 集 酶 反 应 高度 靶 向 性 、 液 相 色 谱 强 大 分 离 能 力 、 质 谱 检 测 器 高 灵 敏 性 及 通 用 性 的 优 势 于 一 体 , 具 有 快 速高 效 、 灵 敏 、 适 用 于 复 杂 体 系 的 特 点 。关 键 词 : 涡 流 色 谱 - 液 相 色 谱 - 质 谱 联 用 ; 靶 向 活 性 筛 选 ; 酶 抑 制 剂 ; 贝 母 ; 甾 体 生 物 碱发 表 论 著 :1. Zhou Jian-Liang, An Jing-Jing, Li Ping*, Li Hui-Jun*, Jiang Yan, ChengJie-Fei.Two-dimensional turbulent flow chromatography coupled on-line to liquidchromatography–mass spectrometry for solution-based ligand screening against multipleproteins. J Chromatogr A, 2009, (1216): 2394–24032. An Jing-Jing, Zhou Jian-Liang, Hui-Jun Li*, Jiang Yan, Li Ping. Puqienine E: An angiotensinconverting enzyme inhibitory steroidal alkaloid from Fritillaria puqiensis. Fitoterapia, 2010,(81): 149–1523. 李 会 军 , 安 婧 婧 , 周 建 良 , 李 萍 . 靶 分 子 亲 和 - 质 谱 联 用 技 术 应 用 于 中 药 等 复 杂 体 系 中 活性 成 分 的 筛 选 . 中 国 药 科 大 学 学 报 , 2009, (40): 97-103会 议 报 告 : 国 际 大 会 : 0 分 组 : 0 国 内 大 会 : 0 分 组 :0154