Luciana Basili Dias Candidíase vulvovaginal em pacientes gestantes

Metodologia 43
As provas foram realizadas em placas de microtitulação com tampa (Evergreen
Scientific, USA), contendo 96 orifícios e fundo plano. Cada antifúngico foi distribuído em uma
placa de microtitulação em alíquotas de 100 µL, desde a coluna 2 até a coluna 11,
correspondendo cada coluna, à uma concentração diferente. A coluna 2 correspondeu à maior
concentração do antifúngico e a coluna 11 à menor concentração. Todos os orifícios das linhas
de A a H foram preenchidos com antifúngicos, exceto os orifícios da coluna 1 e 12, reservados
para controle de esterilidade e controle de crescimento respectivamente.
As placas com diferentes concentrações de antifúngicos foram cobertas com película
plástica (Parafilm) e congeladas à temperatura de - 70º C. Para realização dos testes, as placas
foram descongeladas a temperatura ambiente, 30 à 40 min antes da utilização.
O meio de cultura utilizado no teste de antifungigrama foi o RPMI-1640 (Sigma
Chemical, St. Louis, USA) com 0,165 mol/L de MOPS e pH 7,0.
Meio RPMI – 1640 (com glutamina e vermelho fenol, sem bicarbonato) (CLSI, 2005).
L-arginina ..................... 0,200 g/L Glicina .............................. 0,010 g/L
Biotina .......................... 0,0002 g/L PABA ............................... 0,001 g/L
L-aspargina .................. 0,050 g/L L-histidina ........................ 0,015 g/L
D-pantotênico .............. 0,0002 g/L Piridoxina ......................... 0,001 g/L
L-ácido aspártico .......... 0,020 g/L L-hidroxiprolina ............... 0,020 g/L
Cloreto de colina .......... 0,003 g/L Riboflavina ....................... 0,0002 g/L
L-ácido glutâmico ........ 0,020 g/L L-isoleucina ...................... 0,050 g/L
Ácido fólico ................. 0,001 g/L Tiamina ............................. 0,001 g/L
L-cistina ...................... 0,0652 g/L L-leucina ........................... 0,050 g/L
Mioinositol ................... 0,035 g/L Vitamina B12 ................... 0,000005 g/L
L-glutamina .................. 0,300 g/L
L-lisina .............................. 0,040 g/L
Niacinamida ................. 0,001 g/L Nitrato de cálcio ............... 0,100 g/L
L-metionina .................. 0,015 g/L L-treonina ......................... 0,020 g/L
Cloreto de potássio ....... 0,400 g/L D-glicose .......................... 2,000 g/L
L-fenilalanina ............... 0,015 g/L L-triptofano ...................... 0,005 g/L
Fosfato de sódio ........... 0,800 g/L Glutation ………………... 0,001 g/L
Sulfato de magnésio ..... 0,0488 g/L L-tirosina .......................... 0,029 g/L
L-prolina ...................... 0,020 g/L Vermelho de fenol ............ 0,005 g/L
Cloreto de sódio ........... 6,000 g/L L-valina ............................ 0,020 g/L
L-serina ....................... 0,030 g/L