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Der NEUE Katalog ist da! - PRO PUBLIC GmbH

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4<br />

Reagents<br />

DMSO (Dimethylsulfoxide) is a colourless organic solvent<br />

which penetrates completely into the cell and prevents<br />

the <strong>da</strong>maging formation of ice crystals during the freezing<br />

procedure.<br />

Our Freezing medium is recommended for deep-freezing<br />

of medium. The medium basis is DMEM, supplemented<br />

with a mix of foetal bovine serum and DMSO.<br />

This composition guarantees a high survival rate and a<br />

good cell growth after thawing.<br />

4.15<br />

Reagenzien<br />

Freezing Medium/Einfriermedium<br />

Description/Beschreibung<br />

Unser Einfriermedium eignet sich zum Einfrieren von Zellen.<br />

Als Mediumgrundlage dient DMEM, supplementiert mit<br />

einer Mischung aus fötalem Rinderserum und DMSO.<br />

Diese Zusammensetzung garantiert eine hohe Überlebensrate<br />

und ein gutes Wachstum der Zellen nach dem Auftauen.<br />

Freezing medium 50 ml P07-90050<br />

Introduction for use<br />

freezing of cells with CRYOPAN (in a nitrogen tank)<br />

• Refrigerate freezing medium, culture medium and<br />

freezing tubes!<br />

• Trypsinate cells, than transfer the cells into the culture<br />

medium and centrifuge. Discard the supernatant and<br />

reinsert into the culture medium again.<br />

• Regulate the cell amount to 1 - 5 10 6 /ml. The cells<br />

must be resuspended to avoid clustering.<br />

• Mix the centrifuged cells with the same volume of<br />

cooled freezing medium and pipette it up and down<br />

once. Pipette 1 ml of this cell suspension in every<br />

freezing tube.<br />

• Now place the tubes into the refrigerator for 15 minutes,<br />

because the freezing medium has to penetrate the<br />

cells. After this freeze the tubes at -20° C for two hours.<br />

Over night, place into the gas phase of the liquid<br />

nitrogen.<br />

• Then put freezing tubes into the liquid nitrogen.<br />

Ideal freezing rate: 1° C/minute<br />

Cryo Preservation/Cryokonservierung<br />

Dimethylsulfoxide (DMSO)/Dimethylsulfoxid (DMSO)<br />

Description/Beschreibung<br />

CRYOPAN/CRYOPAN<br />

Description/Beschreibung<br />

DMSO (Dimethylsulfoxid) <strong>ist</strong> ein farbloses organisches Lösungsmittel,<br />

<strong>da</strong>s sich vollständig in der Zelle verteilt und<br />

die Bildung von schädlichen Eiskr<strong>ist</strong>allen beim Einfriervorgang<br />

verhindert.<br />

Dimethylsulfoxide (DMSO) 100 ml P60-15840100<br />

Dimethylsulfoxide (DMSO) for cell culture 100 ml P60-36720100<br />

Gebrauchsanweisung<br />

Einfrieren von Zellen in CRYOPAN (im Stickstoffaufbewahrungsbehälter)<br />

• Einfriermedium, Kulturmedium und Einfrierröhrchen<br />

kalt stellen!<br />

• Zellen trypsinieren, in <strong>da</strong>s Kulturmedium überführen<br />

und abzentrifugieren. Den Überstand verwerfen und<br />

erneut in <strong>da</strong>s Kulturmedium resuspendieren.<br />

• Zellzahl einstellen auf 1 - 5 x 10 6 /ml. Die Zellen <strong>da</strong>bei<br />

gut resuspendieren, <strong>da</strong>mit keine Klumpen vorliegen.<br />

• Die abzentrifugierten Zellen mit dem gleichen Volumen<br />

kaltem Einfriermedium mischen und einmal auf- und<br />

abpipettieren. Von dieser Zellsuspension in jedes<br />

Einfrierröhrchen 1 ml pipettieren.<br />

• Die Ampullen für 15 Minuten in den Kühlschrank geben,<br />

<strong>da</strong>mit <strong>da</strong>s Einfriermedium in die Zellen eindringen<br />

kann. Dann für 2 Stunden bei -20° C tieffrieren.<br />

Über Nacht in die Gasphase des flüssigen Stickstoffs<br />

geben.<br />

• Anschließend die Einfrierröhrchen in fl. Stickstoff überführen.<br />

Optimale Einfrierrate: 1° C / min.<br />

Cryopan I 10 ml P07-92010<br />

50 ml P07-92050<br />

BIOTECH <strong>GmbH</strong>

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