Der NEUE Katalog ist da! - PRO PUBLIC GmbH
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4<br />
Reagents<br />
DMSO (Dimethylsulfoxide) is a colourless organic solvent<br />
which penetrates completely into the cell and prevents<br />
the <strong>da</strong>maging formation of ice crystals during the freezing<br />
procedure.<br />
Our Freezing medium is recommended for deep-freezing<br />
of medium. The medium basis is DMEM, supplemented<br />
with a mix of foetal bovine serum and DMSO.<br />
This composition guarantees a high survival rate and a<br />
good cell growth after thawing.<br />
4.15<br />
Reagenzien<br />
Freezing Medium/Einfriermedium<br />
Description/Beschreibung<br />
Unser Einfriermedium eignet sich zum Einfrieren von Zellen.<br />
Als Mediumgrundlage dient DMEM, supplementiert mit<br />
einer Mischung aus fötalem Rinderserum und DMSO.<br />
Diese Zusammensetzung garantiert eine hohe Überlebensrate<br />
und ein gutes Wachstum der Zellen nach dem Auftauen.<br />
Freezing medium 50 ml P07-90050<br />
Introduction for use<br />
freezing of cells with CRYOPAN (in a nitrogen tank)<br />
• Refrigerate freezing medium, culture medium and<br />
freezing tubes!<br />
• Trypsinate cells, than transfer the cells into the culture<br />
medium and centrifuge. Discard the supernatant and<br />
reinsert into the culture medium again.<br />
• Regulate the cell amount to 1 - 5 10 6 /ml. The cells<br />
must be resuspended to avoid clustering.<br />
• Mix the centrifuged cells with the same volume of<br />
cooled freezing medium and pipette it up and down<br />
once. Pipette 1 ml of this cell suspension in every<br />
freezing tube.<br />
• Now place the tubes into the refrigerator for 15 minutes,<br />
because the freezing medium has to penetrate the<br />
cells. After this freeze the tubes at -20° C for two hours.<br />
Over night, place into the gas phase of the liquid<br />
nitrogen.<br />
• Then put freezing tubes into the liquid nitrogen.<br />
Ideal freezing rate: 1° C/minute<br />
Cryo Preservation/Cryokonservierung<br />
Dimethylsulfoxide (DMSO)/Dimethylsulfoxid (DMSO)<br />
Description/Beschreibung<br />
CRYOPAN/CRYOPAN<br />
Description/Beschreibung<br />
DMSO (Dimethylsulfoxid) <strong>ist</strong> ein farbloses organisches Lösungsmittel,<br />
<strong>da</strong>s sich vollständig in der Zelle verteilt und<br />
die Bildung von schädlichen Eiskr<strong>ist</strong>allen beim Einfriervorgang<br />
verhindert.<br />
Dimethylsulfoxide (DMSO) 100 ml P60-15840100<br />
Dimethylsulfoxide (DMSO) for cell culture 100 ml P60-36720100<br />
Gebrauchsanweisung<br />
Einfrieren von Zellen in CRYOPAN (im Stickstoffaufbewahrungsbehälter)<br />
• Einfriermedium, Kulturmedium und Einfrierröhrchen<br />
kalt stellen!<br />
• Zellen trypsinieren, in <strong>da</strong>s Kulturmedium überführen<br />
und abzentrifugieren. Den Überstand verwerfen und<br />
erneut in <strong>da</strong>s Kulturmedium resuspendieren.<br />
• Zellzahl einstellen auf 1 - 5 x 10 6 /ml. Die Zellen <strong>da</strong>bei<br />
gut resuspendieren, <strong>da</strong>mit keine Klumpen vorliegen.<br />
• Die abzentrifugierten Zellen mit dem gleichen Volumen<br />
kaltem Einfriermedium mischen und einmal auf- und<br />
abpipettieren. Von dieser Zellsuspension in jedes<br />
Einfrierröhrchen 1 ml pipettieren.<br />
• Die Ampullen für 15 Minuten in den Kühlschrank geben,<br />
<strong>da</strong>mit <strong>da</strong>s Einfriermedium in die Zellen eindringen<br />
kann. Dann für 2 Stunden bei -20° C tieffrieren.<br />
Über Nacht in die Gasphase des flüssigen Stickstoffs<br />
geben.<br />
• Anschließend die Einfrierröhrchen in fl. Stickstoff überführen.<br />
Optimale Einfrierrate: 1° C / min.<br />
Cryopan I 10 ml P07-92010<br />
50 ml P07-92050<br />
BIOTECH <strong>GmbH</strong>