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Serum-free Systems
Panexin BMM is a chemically defined serum substitute
for the cultivation of macrophages from mouse bone
marrow (murine bone marrow derived macrophages, BMM)
under serum-free conditions. The ready-to-use sterile solution
in a final concentration of 5 % is added to the basalmedium
RPMI 1640, supplemented with 50 μM Mercaptoethanol
and 2 ng/ml GM-CSF mur. rec.
Composition:
Panexin BMM contains purified proteins, lipids, salts, amino
acids, trace elements, attachment factors and hormones
in an optimized formulation. It contains no growth factors,
undefined hydrolysates or lysates (e. g. Peptones).
Suitability:
Panexin BMM has been developed for the generation of
murine macrophages from bone marrow under serum-free
conditions. This achieves standardized conditions and reproducible
results.
Particular benefits:
Panexin BMM allows the generation of murine macrophages
from bone marrow under standardized serum-free conditions.
The results will be more comparable, as undefined
components – like in serum cultures – are eliminated. In
Panexin BMM matured macrophages will show excellent
attachment capabilities.
Application:
For the production of complete serum-free medium, add
5 % Panexin BMM to RPMI 1640, supplemented with
50 μM Mercaptoethanol and 2ng/ml GM-CSF (murine, rec.).
After the isolation of the bone marrow from a mouse, a
single cell suspension will be achieved through frequent
pipetting. Then centrifuge the cells at 200 x g for 10 minutes.
Resuspend the isolated cells in the serum-free medium
and seed the cells in three 75 mm 2 culture bottles within
20 ml of medium. The incubation is done at 37° C and
5 % CO2 fumigation in the incubator. The feeding of the
cells should be done on day 5 and 7 by an exchange of
10 ml of medium with fresh medium. After 10 days, the
cells can be harvested.
References:
Kristin Eske, Katrin Breitbach, Jens Köhler, Patimaporn
Wongprompitak and Ivo Steinmetz (2008).
Generation of murine bone marrow derived macrophages
in a standardised serum-free cell culture system, Journal
of Immunological Methods.
BIOTECH GmbH
1.12
Serum-freie Systeme
PANEXIN BMM/PANEXIN BMM
Serum Substitute/Serumersatz
Panexin BMM ist ein chemisch definierter Serumersatz
zur Kultivierung von Makrophagen aus murinem Knochenmark
(murine bone marrow derived macrophages, BMM)
unter serumfreien Bedingungen. Die gebrauchsfertige
sterile Lösung wird in einer Endkonzentration von 5 % zum
Basalmedium RPMI 1640 zugegeben, ergänzt mit 50 μM
Mercaptoethanol und 2 ng/ml GM-CSF mur. rec.
Zusammensetzung:
Panexin BMM enthält aufgereinigte Proteine, Lipide, Salze,
Aminosäuren, Spurenelemente, Anheftungsfaktoren und
Hormone in einer optimierten Rezeptur. Es enthält keine
Wachstumsfaktoren und undefinierten Hydrolysate oder
Lysate (z. B. Peptone).
Eignung und Anwendungsgebiete:
Panexin BMM ist für die Generierung von murinen Makrophagen
aus Knochenmark unter serumfreien Bedingungen
entwickelt worden. Dies erlaubt standardisierte Bedingungen
und reproduzierbare Ergebnisse.
Besondere Vorteile:
Panexin BMM ermöglicht die Generierung von murinen
Makrophagen aus Knochenmark unter standardisierten
serumfreien Bedingungen. Die Ergebnisse werden dadurch
vergleichbar, da nicht definierte Komponenten wie sie bei
serumhaltiger Kultur vorkommen, eliminiert werden. In
Panexin BMM gereifte Makrophagen weisen eine exzellente
Adhärenz auf.
Anwendung:
Zur Herstellung des kompletten serumfreien Mediums
5 % Panexin BMM in RPMI 1640 geben, mit 50 μM Mercaptoethanol
und 2ng/ml GM-CSF (murine, rec.) supplementieren.
Nach der Isolierung des Knochenmarks aus einer Maus
erhält man durch häufiges Auf- und Abpipettieren eine
Einzelzellsuspension. Die Zellen werden anschließend bei
200 x g 10 Minuten abzentrifugiert. Die isolierten Zellen
eines Tieres werden im serumfreien Medium resuspendiert
und in drei 75 mm 2 Kulturflaschen mit 20 ml Medium eingesät.
Die Inkubation erfolgt bei 37° C und 5 % CO2-Begasung
im Brutschrank. Eine Fütterung der Zellen erfolgt am
5. und 7. Tag durch Austausch von jeweils 10 ml des Mediums
mit frischem Medium. Nach 10 Tagen können die
Zellen geerntet werden.
Literatur:
Kristin Eske, Katrin Breitbach, Jens Köhler, Patimaporn
Wongprompitak and Ivo Steinmetz (2008).
Generation of murine bone marrow derived macrophages
in a standardised serum-free cell culture system, Journal
of Immunological Methods.
Panexin BMM 100 ml P04-951SA2
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