Der NEUE Katalog ist da! - PRO PUBLIC GmbH

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Laboratory Materials
Contamination of continuous cell lines by mycoplasmata
is a serious problem. As a chronic infection, it impairs the
functions of cell cultures in many ways. They interfere with
the metabolism of the cells altering their growth, their
immunological and biochemical characteristics as well as
their viability. This may have significant implications in
terms of cost and time for the laboratories.
An infection of a cell culture with mycoplasmata cannot
be detected visually or under the microscope. It is therefore
vital to carry out regular tests on the cell culture. The
RIDASCREEN ® ‚ Mycoplasma Immunofluorescence Test
contains highly specific monoclonal antibodies against a
wide range of mycoplasmata, including the species Acholeplasma
laidlawii, Mycoplasma hyorhinis, M. arginini, M.
orale, M. fermentans and M. salivarium, which are known
to be present in 96 % of all cell culture infections.
The RIDASCREEN ® ‚ Mycoplasma IFA is carried out rapidly
and is highly sensitive for the detection of mycoplasmata
due to the application of a second FITC-labelled antibody.
All reactants are ready-made and allow for two test methods:
• One-Step Marking (Mark-Wash-Observe)
For rapid screening of suspected positive cultures.
• Two-Step Marking (Mark-Wash-Mark-Wash-Observe)
For cultures with doubtful or slightly positive initial
results. After the first step, a FITC-labelled anti-MAK
antibody is introduced; incubate for a further 20 minutes
at room temperature.
Results
Yellow-green fluorescence on the rim or between the redcoloured
cells.
Comparative studies of Different Methods for the
Detection of Mycoplasmata in Cell Cultures
8.1
Labormaterialien
Mycoplasma Detection/Mycoplasmen-Nachweis
Description/Beschreibung
Mycoplasmen stellen als Kontaminanten in kontinuierlichen
Zelllinien ein großes Problem dar. Als chronische Infektion
beeinträchtigen sie auf vielfältige Weise die Funktion von
Zellkulturen. Sie nehmen Einfluss auf den Metabolismus
der Zellen und verändern so deren Wachstum, ihre immunologischen
und biochemischen Eigenschaften sowie deren
Lebensfähigkeit. Dies bedeutet Geld- und Zeitverlust
für Zellkultur-Laboratorien.
Die Infektion einer Zellkultur mit Mycoplasmen ist visuell
oder lichtmikroskopisch nicht zu erkennen. Aus diesem
Grunde ist eine regelmäßige Überprüfung einer Zellkultur
wichtig. Der RIDASCREEN Mycoplasmen Immunfluoreszenztest
enthält monoklonale Antikörper mit hoher Spezifität
gegen ein breites Spektrum von Mycoplasmen, einschließlich
der Spezies Acholeplasma laidlawii, Mycoplasma hyorhinis,
M. arginini, M. orale, M. fermentans und M. salivarium,
welche zu mehr als 96 % an Zellkulturinfektionen beteiligt
sind.
Der RIDASCREEN Mycoplasma IFA ist schnell durchzuführen
und durch die Verwendung eines FITC-markierten zweiten
Antikörpers hoch sensitiv für den Nachweis von Mycoplasmen.
Alle Reagenzien sind gebrauchsfertig und erlauben
zwei Arten der Durchführung:
• Ein-Schritt-Färbung (Färben-Waschen-Betrachten)
Zum schnellen Screening wahrscheinlich positiver
Kulturen
• Zwei-Schritt Färbung
(Färben-Wachen-Färben-Waschen-Betrachten)
Für fragliche oder schwach positive Ergebnisse.
Nach dem ersten Schritt wird ein FITC-markierter Anti-
MAK Antikörper zugegeben und weitere 20 min bei
Raumtemperatur inkubiert.
Ergebnisse
Gelbgrüne Fluoreszenz am Rand oder zwischen den rot
gegengefärbten Zellen.
Vergleichende Untersuchungen verschiedener Methoden
zum Nachweis von Mycoplasmen in Zellkulturen
Test method/Testsystem Sensitivity/Sensivität Specifity/Spezifität
DNA-RNA-Hybridisation/DNA-RNA-Hybridisierung 100 % 100 %
PCR (in-house) 100 % 100 %
ELISA 65,5 % 100 %
DNA-Marking (direct)/DNA Färbung (direkt) 93,1 % 92,3 %
RIDASCREEN ® Mycoplasma IFA 100 % 92,3 %
Reference: from culture
42 cell lines (29 pos./13 neg.) of different origin were
tested.
Referenz: kulturelle Anzucht
Es wurden 42 Zelllinien (29 pos./13 neg.) unterschiedlicher
Herkunft untersucht.
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