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Serum-free Systems
BIOTECH GmbH
CHO cells in Panserin C6000
CHO-Zellen in Panserin C6000
Instructions for use:
Adaption to a protein-free culture
Most CHO-cells can be directly transferred from a serum
containing adherent culture into the protein-free suspension
culture. In most cases the stable suspension culture is
developing within approx. 2 weeks.
Direct adaptation to Panserin C6000:
• Use adherent cells in the log phase of a serum
containing culture (for example high glucose DMEM
with 10% FBS).
• Remove serum containing medium with a pipette.
• Wash cell layer with DPBS without Ca/Mg.
• Cover cell layer with trypsin / EDTA (0.25%, 0.02%)
(about 2 ml per T25 flask).
• Remove trypsin after about 1 minute.
• Incubate the cells until they show a round figure and
detach from the surface (about 5 minutes).
• Transfer cells into DPBS and count the cell number.
• Seed 5 x 10 4 - 1 x 10 5 cells/ml in preheated Panserin
C6000. Use flasks for suspension culture (e.g. greiner
bio-one Code 690 190).
• Incubation at 37 °C and 5% CO2 in an incubator.
For a few days the cells will stay in a lag-phase where no
significant cell proliferation will occur. After about one
week, however, the cells will be accustomed to the proteinfree
medium and will have proliferated to 1x10 6 cells/ml.
Transfer the cells every 3 to 4 days into fresh medium.
(Seeding density 3-5 x 10 4 cells/ml).
Generation time of CHO-cells in Panserin C6000: 16.5 h.
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Serum-freie Systeme
PANSERIN C6000/PANSERIN C6000
CHO cells in Panserin C6000
CHO Zellen in Panserin C6000
Gebrauchsanweisung:
Adaption an die protein-freie Kultur
CHO-Zellen können meist direkt aus der serum-haltigen
adhärenten Kultur in eine protein-freie Suspensions-Kultur
überführt werden. Dabei dauert es ca. 2 Wochen bis sich
eine stabile Suspensions-Kultur entwickelt.
Direkte Adaption an Panserin C6000:
• Zellen einer serum-haltigen adhärenten Kultur
• (z.B. DMEM high glucose mit 10 % FBS) aus der logarithmischen
Wachstumsphase verwenden.
• Serum-haltiges Medium mit Pipette abnehmen.
• Zellrasen mit DPBS ohne Ca/Mg, waschen.
• Zellrasen mit Trypsin/EDTA (0,25%, 0,02%) überschichten
(ca. 2 ml auf T25 Flasche).
• Trypsin nach ca. 1 min abnehmen.
• Inkubation bis sich die Zellen abrunden und vom Untergrund
lösen. (nach ca. 5 min).
• Zellen in DPBS aufnehmen und Zellzahl bestimmen.
• 5 x 10 4 - 1 x 10 5 Zellen/ml in vorgewärmtes Panserin
C6000 einsäen. Kulturflaschen für Suspensionskultur
verwenden (z.B. Greiner Bio-One, Code 690 190).
• Inkubation bei 37 °C und 5% CO2 im Brutschrank.
In den ersten Tagen tritt eine lag-Phase ein, wobei kaum
eine Zellvermehrung stattfindet. Nach ca. 7 Tagen jedoch
haben sich die Zellen an das protein-freie Medium gewöhnt
und sich auf 1 x 10 6 Zellen/ml vermehrt.
Zellen alle 3 bis 4 Tage in frisches Medium umsetzen.
(Einsaat 3 – 5 x 10 4 Zellen/ml).
Generationszeit CHO in Panserin C6000: 16,5 h.
PANSERIN C6000 100 ml P04-716000M
500 ml P04-716000
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