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Der NEUE Katalog ist da! - PRO PUBLIC GmbH

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Serum-free Systems<br />

Special Advantages:<br />

In the past, cellular signalling pathways in endothelial cells<br />

have not been decipherable experimentally because even<br />

low concentrations of serum present in traditional media<br />

induce an undefined and undesired stimulation of cell<br />

surface receptors or intracellular signalling which only may<br />

become evident under serum-free conditions. As endothelial<br />

cells move into the field of interest for vascular tissue<br />

engineering with potential therapeutic application, the<br />

presence of whole animal serum is undesirable for such<br />

applications.<br />

Instructions:<br />

It is recommended to use serum-free conditions from the<br />

start. However, sequential a<strong>da</strong>ptation or a<strong>da</strong>ptation with<br />

conditioned media over several passages which is usually<br />

necessary when switching from serum-supplemented to<br />

serum-free culture conditions is not necessary with this<br />

medium. It is not recommended to switch to ENDOPAN<br />

300 SL directly after splitting the cells. Please allow<br />

adhesion of trypsinized cells for 24h before changing the<br />

medium to serum-free.<br />

ENDOPAN 300 SL may also be used on previously serum<br />

exposed endothelial cells with very little weaning. Some<br />

cells may not survive a direct exposure to serum-free<br />

conditions and the cell population may show some delay<br />

in performance or slight changes in morphology. Minor<br />

changes in cellular appearance should not be a matter of<br />

concern as long as viability and proliferation remain at<br />

usual level. A high cell density (close to confluence) before<br />

the a<strong>da</strong>ptation increases survival rates and sequential<br />

seeding at higher density will help cells to perform well in<br />

the new culture environment.<br />

BIOTECH <strong>GmbH</strong><br />

Sub-confluent HUVEC in ENDOPAN 300 SL<br />

Subkonfluente HUVEC in Endopan 300 SL<br />

<br />

1.32<br />

Serum-freie Systeme<br />

ENDOPAN 300 SL/ENDOPAN 300 SL<br />

Besondere Vorteile:<br />

Bisher konnten einige Signalübertragungswege in<br />

Endothelzellen auch deshalb nicht nachgewiesen werden,<br />

weil selbst geringe Mengen an Serum im Medium zu einer<br />

undefinierten und unerwünschten permanenten Aktivierung<br />

bestimmter Rezeptoren und intrazellulärer Signalwege führen,<br />

die nur unter serum-freien Bedingungen erkennbar sind. In<br />

jüngster Zeit rücken Endothelzellen verstärkt ins Blickfeld<br />

möglicher Anwendungen in der Zelltherapie wie z.B. des<br />

vaskulären Tissue Engineering; in diesem Zusammenhang<br />

<strong>ist</strong> die Anwesenheit von Serum in Medien für die Endothelzellkultur<br />

absolut unerwünscht.<br />

Gebrauchsanweisung:<br />

Es wird empfohlen, die Endothelzellen von Anfang an unter<br />

serum-freien Bedingungen zu kultivieren. Allerdings <strong>ist</strong> es<br />

bei diesem Medium nicht nötig, die üblicherweise erforderliche<br />

A<strong>da</strong>ptation über mehrere Passagen von serum-haltiger<br />

zu serum-freier Kultur durchzuführen. Es sollte aber eine<br />

gleichzeitige Passage und Umsetzen in ENDOPAN 300 SL<br />

vermieden werden. Vor dem Wechsel zu serum-freien<br />

Medium sollten die Zellen für mindestens 24 h in dem bisher<br />

verwendeten Endothelzellmedium angewachsen sein.<br />

Nach erfolgreicher Umstellung können die Zellen in<br />

ENDOPAN 300 SL weiter passagiert werden.<br />

ENDOPAN 300 SL kann auch an zuvor in serum-haltigen<br />

Medien kultivierten Endothelzellen ohne eine größere<br />

Umgewöhnungsphase verwendet werden. Es kann aber<br />

vorkommen, <strong>da</strong>ss einige Zellen die Umstellung nicht überleben.<br />

Dies kann zu einer Verzögerung im Proliferationsverhalten<br />

oder morphologischen Veränderungen führen.<br />

Solche Beobachtungen stellen aber kein Problem <strong>da</strong>r, solange<br />

die Kultur ein vitales Erscheinungsbild und eine normale<br />

Proliferationsrate zeigt. Eine höhere Zelldichte erhöht die<br />

Erfolgsaussichten der Umstellung auf serum-freie Kultur und<br />

anschließende Aussaat in höherer Dichte gewährle<strong>ist</strong>et die<br />

normale Funktion der Zellen in der neuen Umgebung.<br />

Confluent HUVEC in ENDOPAN 300 SL<br />

Konfluente HUVEC in Endopan 300 SL<br />

Endopan 300 SL ready-to-use 500 ml P04-00650<br />

Endopan 300 SL kit with 9 supplements 500 ml P04-0065K<br />

Reagents / Reagenzien<br />

PANEXIN SL-S Serum Substitute for HUVEC cultures 25 ml P04-90065S<br />

SL-S Trypsin/EDTA 50 ml P10-0231SF<br />

SL-S Trypsin-Inhibitor 50 ml P10-0331SF<br />

SL-S Medium (Working Medium) 500 ml P04-300500<br />

SL-S Collagen 0.01 % 25 ml P06-20650<br />

SL-S Cryopan 25 ml P07-94050<br />

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