Der NEUE Katalog ist da! - PRO PUBLIC GmbH
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Serum-free Systems<br />
Special Advantages:<br />
In the past, cellular signalling pathways in endothelial cells<br />
have not been decipherable experimentally because even<br />
low concentrations of serum present in traditional media<br />
induce an undefined and undesired stimulation of cell<br />
surface receptors or intracellular signalling which only may<br />
become evident under serum-free conditions. As endothelial<br />
cells move into the field of interest for vascular tissue<br />
engineering with potential therapeutic application, the<br />
presence of whole animal serum is undesirable for such<br />
applications.<br />
Instructions:<br />
It is recommended to use serum-free conditions from the<br />
start. However, sequential a<strong>da</strong>ptation or a<strong>da</strong>ptation with<br />
conditioned media over several passages which is usually<br />
necessary when switching from serum-supplemented to<br />
serum-free culture conditions is not necessary with this<br />
medium. It is not recommended to switch to ENDOPAN<br />
300 SL directly after splitting the cells. Please allow<br />
adhesion of trypsinized cells for 24h before changing the<br />
medium to serum-free.<br />
ENDOPAN 300 SL may also be used on previously serum<br />
exposed endothelial cells with very little weaning. Some<br />
cells may not survive a direct exposure to serum-free<br />
conditions and the cell population may show some delay<br />
in performance or slight changes in morphology. Minor<br />
changes in cellular appearance should not be a matter of<br />
concern as long as viability and proliferation remain at<br />
usual level. A high cell density (close to confluence) before<br />
the a<strong>da</strong>ptation increases survival rates and sequential<br />
seeding at higher density will help cells to perform well in<br />
the new culture environment.<br />
BIOTECH <strong>GmbH</strong><br />
Sub-confluent HUVEC in ENDOPAN 300 SL<br />
Subkonfluente HUVEC in Endopan 300 SL<br />
<br />
1.32<br />
Serum-freie Systeme<br />
ENDOPAN 300 SL/ENDOPAN 300 SL<br />
Besondere Vorteile:<br />
Bisher konnten einige Signalübertragungswege in<br />
Endothelzellen auch deshalb nicht nachgewiesen werden,<br />
weil selbst geringe Mengen an Serum im Medium zu einer<br />
undefinierten und unerwünschten permanenten Aktivierung<br />
bestimmter Rezeptoren und intrazellulärer Signalwege führen,<br />
die nur unter serum-freien Bedingungen erkennbar sind. In<br />
jüngster Zeit rücken Endothelzellen verstärkt ins Blickfeld<br />
möglicher Anwendungen in der Zelltherapie wie z.B. des<br />
vaskulären Tissue Engineering; in diesem Zusammenhang<br />
<strong>ist</strong> die Anwesenheit von Serum in Medien für die Endothelzellkultur<br />
absolut unerwünscht.<br />
Gebrauchsanweisung:<br />
Es wird empfohlen, die Endothelzellen von Anfang an unter<br />
serum-freien Bedingungen zu kultivieren. Allerdings <strong>ist</strong> es<br />
bei diesem Medium nicht nötig, die üblicherweise erforderliche<br />
A<strong>da</strong>ptation über mehrere Passagen von serum-haltiger<br />
zu serum-freier Kultur durchzuführen. Es sollte aber eine<br />
gleichzeitige Passage und Umsetzen in ENDOPAN 300 SL<br />
vermieden werden. Vor dem Wechsel zu serum-freien<br />
Medium sollten die Zellen für mindestens 24 h in dem bisher<br />
verwendeten Endothelzellmedium angewachsen sein.<br />
Nach erfolgreicher Umstellung können die Zellen in<br />
ENDOPAN 300 SL weiter passagiert werden.<br />
ENDOPAN 300 SL kann auch an zuvor in serum-haltigen<br />
Medien kultivierten Endothelzellen ohne eine größere<br />
Umgewöhnungsphase verwendet werden. Es kann aber<br />
vorkommen, <strong>da</strong>ss einige Zellen die Umstellung nicht überleben.<br />
Dies kann zu einer Verzögerung im Proliferationsverhalten<br />
oder morphologischen Veränderungen führen.<br />
Solche Beobachtungen stellen aber kein Problem <strong>da</strong>r, solange<br />
die Kultur ein vitales Erscheinungsbild und eine normale<br />
Proliferationsrate zeigt. Eine höhere Zelldichte erhöht die<br />
Erfolgsaussichten der Umstellung auf serum-freie Kultur und<br />
anschließende Aussaat in höherer Dichte gewährle<strong>ist</strong>et die<br />
normale Funktion der Zellen in der neuen Umgebung.<br />
Confluent HUVEC in ENDOPAN 300 SL<br />
Konfluente HUVEC in Endopan 300 SL<br />
Endopan 300 SL ready-to-use 500 ml P04-00650<br />
Endopan 300 SL kit with 9 supplements 500 ml P04-0065K<br />
Reagents / Reagenzien<br />
PANEXIN SL-S Serum Substitute for HUVEC cultures 25 ml P04-90065S<br />
SL-S Trypsin/EDTA 50 ml P10-0231SF<br />
SL-S Trypsin-Inhibitor 50 ml P10-0331SF<br />
SL-S Medium (Working Medium) 500 ml P04-300500<br />
SL-S Collagen 0.01 % 25 ml P06-20650<br />
SL-S Cryopan 25 ml P07-94050<br />
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