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Serum-free Systems
Preparation of PowerStem HPSC medium:
PowerStem HPSC basal medium requires supplementation
with PowerStem HPSC growth supplement and PowerStem
HPSC cytokine supplement. Thaw PowerStem HPSC
supplements before use. The thawed material should be
used immediately or aliquoted and stored at -20° C.
To obtain 500 ml PowerStem HPSC complete medium
please add 13 ml of thawed PowerStem HPSC growth
supplement and 1 ml PowerStem cytokine supplement
to 486 ml of PowerStem HPSC basal medium. PowerStem
HPSC complete medium (basal medium with supplements)
is stable for 3 months when stored in the dark at +2° C to
+8° C.
Instructions for use:
Expansion
• Prepare mononuclear cells (e.g. PBMC) with Pancoll
human (P04-60500). For further enrichment of CD34+
cells use e.g. MiniMACS (Miltenyi) or comparable
systems according to the manufacturer’s instructions.
• CD34+ cells were seeded at an initial density of 2x10 4
cells/ml in PowerStem HPSC complete medium at 37 °C
in an incubator with 5% CO2/95% air atmosphere.
• An initial lag phase of about 3 days is observed, because
the majority of hematopoietic stem cells are in a
quiescent (G0) state.
• Replace spent medium with fresh complete medium
every 3-4 days.
Differentiation
• Erythropoietin (EPO) and Interleukin 6 (IL-6) stimulate
the differentiation of CD34+ hematopoietic cells into
red blood cell precursors (BFU-E cells, burst forming
unit erythroid).
• For the development of BFU-E cells add EPO 10 U/ml
and IL-6 10 μg/ml (final concentration) to the cell culture
Reference:
Horschitz S et al. (2010) Generation of neuronal cells from
human peripheral blood mononuclear cells. NeuroReport
21:185
For more references see www.pan-biotech.de.
BIOTECH GmbH
1.62
Serum-freie Systeme
PowerStem HPSC/PowerStem HPSC
Hematopoetic stem cells from neonatal cord blood in PowerStem HPSC
Hematopoetische Stammzellen aus Nabelschnurblut in PowerStem HPSC
Zubereitung PowerStem HPSC Medium:
Das PowerStem HPSC Basal Medium muss mit PowerStem
HPSC Growth Supplement und PowerStem HPSC Cytokine
Supplement ergänzt werden. Tauen sie die HPSC
Supplemente vor Gebrauch auf. Das aufgetaute Material
sollte sofort verbraucht oder aliquotiert bei -20° C gelagert
werden.
Um 500 ml PowerStem HPSC Komplettmedium zu erhalten,
fügen Sie bitte 13 ml aufgetautes PowerStem HPSC Growth
Supplement und 1 ml PowerStem HPSC Cytokine
Supplement zu 486 ml PowerStem HPSC Basal Medium.
Das PowerStem HPSC Komplett-Medium (Basalmedium
mit Supplementen) ist bei Lagerung im Dunkeln bei +2°
C bis +8° C für 3 Monate stabil.
Gebrauchsanweisung:
Expansion
• Präparieren Sie mononukleäre Zellen (z. B. PBMC) mit
Pancoll human (P04-60500). Für eine weitere
Anreicherung von CD34+ Zellen verwenden Sie bitte
z.B. MiniMACS (Miltenyi) oder vergleichbare Systeme
nach Anweisung des Herstellers.
• CD34+ Zellen werden mit einer Dichte von 2x10 4
Zellen pro ml in PowerStem HPSC-Komplettmedium
bei 37 °C in 5% CO2/95% Luft-Atmosphäre kultiviert.
• Innerhalb der ersten drei Tage wird nur ein relativ
langsames Zellwachstum beobachtet, da die Mehrheit
der hämatopoetischen Stammzellen sich im Ruhezustand
(G0) befindet.
• Ersetzen Sie verbrauchtes Medium alle 3-4 Tage mit
frischem Komplettmedium.
Differenzierung
• Erythropoietin (EPO) und Interleukin 6 (IL-6) stimulieren
die Differenzierung von CD34+ hämatopoetischen
Zellen in rote Blutzellvorläufer (BFU-E-Zellen, burst
forming unit erythroid).
• Für die Entwicklung von BFU-E-Zellen geben Sie EPO
(10 U/ml) und IL-6 (10 μg/ml) zur Zellkultur.
Literatur:
Horschitz S et al. (2010) Generation of neuronal cells from
human peripheral blood mononuclear cells. NeuroReport
21:185
Für weitere Literatur siehe www.pan-biotech.de.
PowerStem HPSC 100 ml Kit P04-77410K
500 ml Kit P04-77450K
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