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Der NEUE Katalog ist da! - PRO PUBLIC GmbH

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Services<br />

Protein<br />

Colorimetric test (Biuret-reaction). Bivalent copper reacts<br />

in alkaline solution with the peptide bond of albumin to<br />

the character<strong>ist</strong>ic purple coloured biuret complex. With<br />

sodium-potassium-tartrat a precipitation of copper-hydroxide<br />

and with potassium-iodide the automatic reduction of copper<br />

is prevented. The colour intensity is directly proportional<br />

to the albumin concentration, which is analyzed photometricly.<br />

Osmolality<br />

The osmolality is analyzed by freezing point depression.<br />

Calibrating the osmometer is made by the use of stan<strong>da</strong>rd<br />

solutions.<br />

pH-value<br />

Assessed with pH-electrode.<br />

Haemoglobin<br />

The concentration of haemoglobin is assessed spectrophotometricly<br />

with three different wave lengths.<br />

IgG<br />

Radial immune diffusion. Antibodies in agarose precipitate<br />

in the equivalence area with antigens, which, pipetted into<br />

a gel hole, diffuse radial outwards. The diameter of the<br />

precipitation ring is proportional to the concentration of<br />

the applied antigen containing solution.<br />

Triglyceride<br />

Enzymatic colour test on the basis of the Trinderreaction<br />

with extinction increase.<br />

Cholesterin<br />

Enzymatic colour test with extinction increase.<br />

Glucose<br />

Enzymatic colorimetric test on the basis of the Trinderreaction.<br />

Tetracyclin<br />

Sera are tested for suitability for tet-inducible systems. If<br />

a tet-off-system is used, an acceptable expression of aim<br />

proteins is only warranted when no tetracycline is attended.<br />

Necessary conditions therefore are cell culture media and<br />

sera containing no tetracycline. For the tests a CHO cell<br />

line is used, which contains a tet controlled luciferase gen<br />

(CHO-Luc) in a reporter gen construct. When these cells<br />

are cultured without tetracycline, an expression of the luciferase<br />

enzyme will be induced, which is quantified with<br />

Promegas luciferase test system.<br />

Endotoxin<br />

Endotoxins are an essential part of the lipopolysaccharides<br />

of the exterior cell wall of gram-negative bacteria. The endotoxin<br />

value is analyzed with the kinetic LAL method. The<br />

limulus amoebacytes lysate (LAL) cons<strong>ist</strong> of an aqueous<br />

extract of horseshoe crab (limulus polyphemus) blood cells.<br />

In the presence of endotoxin LAL generate a turbidity where<br />

with the endotoxin value of a sample can be analyzed.<br />

BIOTECH <strong>GmbH</strong><br />

<br />

5.2<br />

Dienstle<strong>ist</strong>ungen<br />

Biochemical Tests/Biochemische Testungen<br />

Protein<br />

Colorimetrischer Test (Biuret-Reaktion). Zweiwertiges Kupfer<br />

reagiert in alkalischer Lösung mit der Peptidbindung der<br />

Eiweiße zum charakter<strong>ist</strong>ischen purpurfarbenen Biuretkomplex.<br />

Mit Natrium-Kalium-Tartrat wird die Ausfällung von<br />

Kupferhydroxid und mit Kaliumjodid die Autoreduktion des<br />

Kupfers verhindert. Die Farbintensität <strong>ist</strong> direkt proportional<br />

zur Eiweißkonzentration, die photometrisch gemessen<br />

wird.<br />

Osmolalität<br />

Die Osmolalität wird durch Gefrierpunkterniedrigung bestimmt.<br />

Kalibrierung des Osmometers erfolgt gegen Stan<strong>da</strong>rdlösungen.<br />

pH-Wert<br />

Messung mit pH-Elektrode.<br />

Hämoglobin<br />

Die Hämoglobinkonzentration wird spektrophotometrisch<br />

bei drei verschiedenen Wellenlängen bestimmt.<br />

IgG<br />

Radiale Immundiffusion. In Agarose enthaltene Antikörper<br />

präzipitieren im Äquivalenzbereich mit Antigenen, die, in<br />

ein Gelloch pipettiert, radial nach außen diffundieren. <strong>Der</strong><br />

Durchmesser des Präzipitatringes <strong>ist</strong> proportional der<br />

Konzentration der aufgetragenen Antigenhaltigen Lösung.<br />

Triglyceride<br />

Enzymatischer Farbtest auf Grundlage der Trinderreaktion<br />

mit Extinktionszunahme.<br />

Cholesterin<br />

Enzymatischer Farbtest mit Extinktionszunahme.<br />

Glucose<br />

Enzymatisch colorimetrischer Test auf Basis der Trinder-<br />

Reaktion.<br />

Tetracyclin<br />

Seren werden auf ihre Tauglichkeit für Tet-induzierbare<br />

Systeme getestet. Wenn ein Tet-off-System verwendet wird,<br />

<strong>ist</strong> eine ausreichende Expression des Zielproteins nur in<br />

Abwesenheit von Tetracyclin gegeben. Vorraussetzung <strong>da</strong>für<br />

sind Zellkulturmedien und Seren, die kein Tetracyclin<br />

enthalten. Zur Testung wird eine CHO-Zelllinie verwendet,<br />

die in einem Reportergenkonstrukt ein Tet-kontrolliertes<br />

Luciferase-Gen enthält (CHO-Luc). Werden diese Zellen in<br />

Abwesenheit von Tetracyclin kultiviert, so kommt es zur<br />

Expression des Enzyms Luciferase, <strong>da</strong>s mit Hilfe des Luciferase-Testsystems<br />

von Promega quantifiziert werden kann.<br />

Endotoxin<br />

Als Endotoxin bezeichnet man Bestandteile der Lipopolysaccharide<br />

der äußeren Zellwand gram-negativer Bakterien.<br />

<strong>Der</strong> Endotoxingehalt wird mit der kinetischen LAL-Methode<br />

bestimmt. Das Limulus Amöbozyten Lysat (LAL) besteht<br />

aus einem wässrigen Extrakt der Blutzellen des Pfeilschwanzkrebses<br />

(Limulus polyphemus). In Gegenwart von<br />

Endotoxin entwickelt LAL eine Trübung mit deren Hilfe der<br />

Endotoxingehalt einer Probe bestimmt werden kann.<br />

4<br />

5

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