Approche quantitative de la fonction de nourricerie jouée par les ...

Chapitre 4 : Reconstitution de l’histoire de vie des jeunes bars (Dicentrarchus labrax L.)
de quatre nourriceries littorales de la façade ouest de la France par otolithochronologie.
2.2.1. Préparation des otolithes et détermination des âges.
Après extraction, les otolithes sont nettoyés de la membrane otique puis rincés à
l’alcool avant séchage et stockage. Des préparations pour le ponçage sont effectuées à l’aide
de résine autopolymérisante à froid (Orthorésine DENTSPLY). Les otolithes sont déposés sur
une lame et une paille alimentaire est apposée afin de servir de moule lors de l’enrobage. Les
otolithes sont ensuite poncés à l’eau sur plaque rotative à l’aide de disque de granulométries
différentielles (1000 µM – 0,1 µm). Après décalcification à l’E.D.T.A. (Ethylene Diamine
Tetraacetic Acid) 0,05 M durant 15 min les otolithes sont rincées à l’eau MilliQ puis séchés à
l’aide d’air sous pression. L’observation sous microscope électronique à balayage peut être
effectuée après la phase de métallisation à l’or. Les images M.E.B. (JEOL JSM 5410LV
(Low vacuum)) sont ensuite réalisées et des rayons sont extraits grâce à des montages de
plusieurs images réalisées (x200). Des comptages manuels sont ensuite effectués et
synthétisés par site. Un double comptage a été effectué sur les images MEB en aveugle et les
comptages n’ont pas révélé de différence significative. Nous avons donc pris en compte la
première lecture.
2.2.2. Mise en évidence des stries journalières
Afin de valider la présence de stries journalières chez le bar européen un protocole de
capture marquage-recapture a été mis en place chez des juvéniles en élevage. Ainsi, 102
juvéniles de bars âgés de 660 jours ont été achetés dans une ferme aquacole (Ferme des
Baleines, Ile de Ré). Après le transport et 13 jours d’acclimatation dans les marais
expérimentaux du C.R.E.L.A., les poissons sont endormis à l’eugénol (essence de clou de
girofle) puis une injection de Terramycine est effectuée (forme commerciale de la
Tétracycline). Ce fluorochrome émet un rayonnement jaune (560 nm) lorsqu’il est excité à
390 nm. Des observations sous microscope optique à épifluorescence (ZEISS AXIOSCOPE 2
MOT PLUS) sont réalisées, et des photographies en lumière blanche et en rayonnement
ultraviolet (x400) sont prises. Les comptages de stries entre la marque spéciale de transport et
le marquage à la Terramycine sont ensuite réalisés plusieurs jours après le marquage. Une
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