dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola
dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola
dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
jellegzetességek segítségével, amelyek együttesen nagy valószínűséggel jellemzik az<br />
őssejt-állapotot (Rietze és mtsai 2001, Capela és Temple 2002, Uchida és mtsai 2000).<br />
Lehetséges a szekunder germinatív régió környéki terület sebészi disszekciója, majd az<br />
ebből származó sokszínű, disszociáltatott „sejtkeverék” specifikus mitogének melletti<br />
tenyésztése és karakterizálása a neurális őssejtek kinyerésére. Kísérleti körülmények<br />
között (transzfektált sejtek vagy transzgenikus állatok felhasználásával), az idegi<br />
progenitorok specifikus promóterei (pl. mushashi, nestin) által meghajtott riportergének<br />
expressziója alapján történő sejtválogatása is lehetséges (Roy és mtsai 2000, Sawamoto<br />
és mtsai 2001).<br />
A felhasznált sejtvonalak befogadó szöveten belüli, in vivo azonosítására ún.<br />
markergéneket lehet bejuttani genetikai módosítással (transzfekció) a laboratóriumban<br />
fenntartott sejtvonalak sejtjeibe. A markergének előidézhetik mikroszkópos technikával<br />
azonosítható fluoreszkáló fehérjék (pl. zöld fluoreszcens fehérje [GFP]) megjelenését,<br />
vagy látható csapadékot képező/lumineszcenciát kiváltó új enzim termelődését<br />
(galaktozidáz lacZ, hőrezisztens placentáris alkalikus fosztatáz, luciferáz) a sejten belül.<br />
Hasonló technikával terápiás célú géntermékek termelődését is előidézhetjük a<br />
sejtvonalban. Ezek lehetnek<br />
� idegi növekedési faktorok, neurotrofinok (NGF, BDNF, NT-3), amelyek az<br />
idegsejtek túlélését segítik (Martinez-Serrano és mtsai 1995, Grider és mtsai 2005)<br />
� enzimek (tirozin-hi<strong>dr</strong>oxiláz, béta-glükuronidáz, béta-hexózaminidáz), amelyek<br />
hiányzó enzimeket pótolnak, vagy neurotranszmitter-hiányt mérsékelhetnek (Lundberg<br />
és mtsai 1996, Snyder és mtsai 1995, Lacorazza és mtsai 1996)<br />
� géntermékek (Nurr-1), amelyek a célzott differenciálódást segítik elő (Lindvall<br />
és mtsai 2004)<br />
� citokinek (LIF, TNF-alfa, IFN-gamma, IL-12), amelyek regenerációt segítő<br />
(Blesch és mtsai 1999) vagy tumorellenes hatást gyakorolhatnak (Ehtesham és mtsai<br />
2002a, b)<br />
A terápiás és markergének expressziója néhány osztódás után lecsökkenhet, eltűnhet, ha<br />
a gén a genomnak olyan részére épül be, amely az érett sejtben már nem íródik át.<br />
26
Change language