dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola
dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola
dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
expressziója a vizsgált időszakban sem a normoxiás, sem a hipoxiás kultúrákban nem<br />
indult meg (39. ábra).<br />
A<br />
HPRT<br />
ngn2<br />
RA<br />
N0-2 H0-2 N2-4 H2-4 N4-6 H4-6<br />
B RA<br />
RA0-2<br />
HPRT<br />
math2<br />
blbp<br />
GFAP<br />
38. ábra Az elkötelezett idegi prekurzorok időszakában (2-4., 4-6. nap) alkalmazott hipoxiás kezelés (H)<br />
a proneurális ngn2 gén expresszióját csökkentette a normoxiás körülményekhez képest (N) (A). Az<br />
idegsejtképzés időszakában (4-6., 6-8. nap) alkalmazott hipoxiás kezelés a neuron-specifikus math2 gén<br />
kifejeződését igen jelentősen csökkentette (B). A korai gliális gén, blbp expressziója nem változott a<br />
tenyészetekben hypoxia hatására, míg az asztrogliára jellemző GFAP a vizsgált időszak alatt nem jelent<br />
meg a kultúrákban (B). Teljes RNS minták gyűjtése a hipoxiát követően (A) és az indukció 8. napján (B)<br />
történt. HPRT: nukleinsav mennyiség kontrollja. RAØ: indukálatlan, RA0-2: retinsav-indukált<br />
tenyészetek.<br />
A hipoxiás kezelés tehát az őssejt-gének kifejeződésében nem okozott csökkenést, míg a<br />
proneurális és neurális gének expressziójának csökkenéséhez vezetett. A korai és érett<br />
gliális génkifejeződés nem változott a normoxiás mintákhoz képest.<br />
Vizsgálataink alapján, az alacsony oxigéntenzió lényeges változásokhoz vezetett az<br />
őssejtek in vitro viselkedésében. Míg az elkötelezetlen őssejt-stádiumban nem volt<br />
különbség a hipoxiás kezelésen átesett és a normoxiás körülmények között lévő<br />
őssejtek életképessége és sejtproliferációs rátája között, az idegi sejtfejlődés<br />
előrehaladottabb stádiumaiban (4-6., 6-8. indukciós napokon) alkalmazott 48 órás<br />
hipoxiás kezelés mindkét sejtfunkcióban jelentős csökkenést okozott.<br />
Különböző elkötelezettségű tenyészetek idegsejt-képzése hipoxiás kezelés hatására<br />
eltérően változott. Az őssejt-tenyészetek spontán differenciációs képességére az<br />
alacsony O2-tenzió nem gyakorolt hatást. Az elköteleződés útjára lépett (indukálódó)<br />
tenyészetekben azonban az (elköteleződés korai vagy késői szakában) alkalmazott<br />
77<br />
RA0-2<br />
H0-2 H0-2 H2-4 H4-6 H6-8 N0-8<br />
H0-2 H0-2 H2-4 H4-6 H6-8 N0-8