02.11.2012 Views

dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola

dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola

dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

expressziója a vizsgált időszakban sem a normoxiás, sem a hipoxiás kultúrákban nem<br />

indult meg (39. ábra).<br />

A<br />

HPRT<br />

ngn2<br />

RA<br />

N0-2 H0-2 N2-4 H2-4 N4-6 H4-6<br />

B RA<br />

RA0-2<br />

HPRT<br />

math2<br />

blbp<br />

GFAP<br />

38. ábra Az elkötelezett idegi prekurzorok időszakában (2-4., 4-6. nap) alkalmazott hipoxiás kezelés (H)<br />

a proneurális ngn2 gén expresszióját csökkentette a normoxiás körülményekhez képest (N) (A). Az<br />

idegsejtképzés időszakában (4-6., 6-8. nap) alkalmazott hipoxiás kezelés a neuron-specifikus math2 gén<br />

kifejeződését igen jelentősen csökkentette (B). A korai gliális gén, blbp expressziója nem változott a<br />

tenyészetekben hypoxia hatására, míg az asztrogliára jellemző GFAP a vizsgált időszak alatt nem jelent<br />

meg a kultúrákban (B). Teljes RNS minták gyűjtése a hipoxiát követően (A) és az indukció 8. napján (B)<br />

történt. HPRT: nukleinsav mennyiség kontrollja. RAØ: indukálatlan, RA0-2: retinsav-indukált<br />

tenyészetek.<br />

A hipoxiás kezelés tehát az őssejt-gének kifejeződésében nem okozott csökkenést, míg a<br />

proneurális és neurális gének expressziójának csökkenéséhez vezetett. A korai és érett<br />

gliális génkifejeződés nem változott a normoxiás mintákhoz képest.<br />

Vizsgálataink alapján, az alacsony oxigéntenzió lényeges változásokhoz vezetett az<br />

őssejtek in vitro viselkedésében. Míg az elkötelezetlen őssejt-stádiumban nem volt<br />

különbség a hipoxiás kezelésen átesett és a normoxiás körülmények között lévő<br />

őssejtek életképessége és sejtproliferációs rátája között, az idegi sejtfejlődés<br />

előrehaladottabb stádiumaiban (4-6., 6-8. indukciós napokon) alkalmazott 48 órás<br />

hipoxiás kezelés mindkét sejtfunkcióban jelentős csökkenést okozott.<br />

Különböző elkötelezettségű tenyészetek idegsejt-képzése hipoxiás kezelés hatására<br />

eltérően változott. Az őssejt-tenyészetek spontán differenciációs képességére az<br />

alacsony O2-tenzió nem gyakorolt hatást. Az elköteleződés útjára lépett (indukálódó)<br />

tenyészetekben azonban az (elköteleződés korai vagy késői szakában) alkalmazott<br />

77<br />

RA0-2<br />

H0-2 H0-2 H2-4 H4-6 H6-8 N0-8<br />

H0-2 H0-2 H2-4 H4-6 H6-8 N0-8

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!