02.11.2012 Views

dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola

dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola

dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola

SHOW MORE
SHOW LESS

Create successful ePaper yourself

Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.

sejtproliferáció mértékét azonban a normoxiás kontrollhoz képest is jelentősen<br />

csökkentette.<br />

A tenyészetekben a sejthalál mértékét TUNEL-reakció segítségével becsültem meg.<br />

Alacsony oxigén tenzió következtében mind a retinsavas indukción átesett, mind a nem-<br />

indukált GFP-4C tenyészetek apoptózis-(nekrózis) aránya jelentősen nőtt. A TUNEL-<br />

pozitív sejtek aránya legszembeszökőbben a retinsavas indukció első két napján, az<br />

idegi elköteleződés elején nőtt meg a hipoxiás kezelés hatására (36/ C ábra).<br />

Az életképesség és sejtproliferáció vizsgálatai azt mutatták, hogy a GFP-4C idegi<br />

őssejtek és a belőlük differenciálódó utódsejtek – differenciációs állapotuktól függően -<br />

eltérően reagálnak az alacsony oxigén-tenzióra. Míg az elkötelezetlen és a fejlődés korai<br />

stádiumában lévő sejtek életképességét és szaporodását a hipoxia nem csökkentette, az<br />

idegi fejlődés előrehaladottabb stádiumaiban 48 órás hipoxiás kezelés mindkét<br />

sejtfunkcióban mérhető csökkenést okozott. A hipoxiás kezelés az apoptotikus<br />

sejtalakok jelenlétét növelte a tenyészetekben.<br />

35. ábra A GFP-4C sejtek „viselkedése” hipoxiás kezelést követően<br />

A: A tenyészetek életképessége a normoxiás kontrolltenyészetek százalékában (100%: fekete vonal) 48<br />

órás hipoxiát követően. A számítások 5 független kísérlet során nyert 6-10 parallel minta adataiból<br />

történtek. Szaggatott fekete vonalak: normoxiás adatok szórásátlagai.<br />

B: Normoxiás tenyészetek és különböző idegi indukciós stádiumban (0-2., 2-4., 4-6., 6-8. nap) 48 órás<br />

hipoxiával kezelt tenyészetek [ 3 H]-timidin inkorporációjának [DPM/ g fehérje] összehasonlítása (n=4).<br />

Normoxiás minták: �, hipoxiás minták: �.<br />

C: TUNEL-pozitív apoptotikus-(nekrotikus) sejtek aránya a tenyészetekben 48 órás hipoxiás kezelést<br />

követően indukálatlan, az indukció 2. és 8. napján lévő tenyészetekben. 40 látótérből történt sejtszámlálás<br />

minden kezelési csoportban. Normoxiás minták: �, hipoxiás minták: �.<br />

RAØ: indukálatlan tenyészetek, RA0-2: a kiültetést követően a 0-2. napon retinsavval indukált<br />

tenyészetek. Átlagok és szórások az ábrákon feltüntetve. Statisztika: A, B: ANOVA, C: Student T-teszt,<br />

*: p

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!