dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola
dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola
dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
sejtproliferáció mértékét azonban a normoxiás kontrollhoz képest is jelentősen<br />
csökkentette.<br />
A tenyészetekben a sejthalál mértékét TUNEL-reakció segítségével becsültem meg.<br />
Alacsony oxigén tenzió következtében mind a retinsavas indukción átesett, mind a nem-<br />
indukált GFP-4C tenyészetek apoptózis-(nekrózis) aránya jelentősen nőtt. A TUNEL-<br />
pozitív sejtek aránya legszembeszökőbben a retinsavas indukció első két napján, az<br />
idegi elköteleződés elején nőtt meg a hipoxiás kezelés hatására (36/ C ábra).<br />
Az életképesség és sejtproliferáció vizsgálatai azt mutatták, hogy a GFP-4C idegi<br />
őssejtek és a belőlük differenciálódó utódsejtek – differenciációs állapotuktól függően -<br />
eltérően reagálnak az alacsony oxigén-tenzióra. Míg az elkötelezetlen és a fejlődés korai<br />
stádiumában lévő sejtek életképességét és szaporodását a hipoxia nem csökkentette, az<br />
idegi fejlődés előrehaladottabb stádiumaiban 48 órás hipoxiás kezelés mindkét<br />
sejtfunkcióban mérhető csökkenést okozott. A hipoxiás kezelés az apoptotikus<br />
sejtalakok jelenlétét növelte a tenyészetekben.<br />
35. ábra A GFP-4C sejtek „viselkedése” hipoxiás kezelést követően<br />
A: A tenyészetek életképessége a normoxiás kontrolltenyészetek százalékában (100%: fekete vonal) 48<br />
órás hipoxiát követően. A számítások 5 független kísérlet során nyert 6-10 parallel minta adataiból<br />
történtek. Szaggatott fekete vonalak: normoxiás adatok szórásátlagai.<br />
B: Normoxiás tenyészetek és különböző idegi indukciós stádiumban (0-2., 2-4., 4-6., 6-8. nap) 48 órás<br />
hipoxiával kezelt tenyészetek [ 3 H]-timidin inkorporációjának [DPM/ g fehérje] összehasonlítása (n=4).<br />
Normoxiás minták: �, hipoxiás minták: �.<br />
C: TUNEL-pozitív apoptotikus-(nekrotikus) sejtek aránya a tenyészetekben 48 órás hipoxiás kezelést<br />
követően indukálatlan, az indukció 2. és 8. napján lévő tenyészetekben. 40 látótérből történt sejtszámlálás<br />
minden kezelési csoportban. Normoxiás minták: �, hipoxiás minták: �.<br />
RAØ: indukálatlan tenyészetek, RA0-2: a kiültetést követően a 0-2. napon retinsavval indukált<br />
tenyészetek. Átlagok és szórások az ábrákon feltüntetve. Statisztika: A, B: ANOVA, C: Student T-teszt,<br />
*: p