dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola

Eredmények
I. NE-4C sejtek „sorsa” intakt és sérült felnőtt agyi környezetben
A laboratóriumunkban korábban nyert adatok szerint, míg az NE-4C idegi őssejtek
integrálódnak az embrionális agyszövetbe, túlélésüket és szöveti fejlődésüket a kifejlett
agyszövet nem támogatja. Mivel a szövetgenezis és regeneráció sok lépése hasonlóan
zajlik, felvetődött a kérdés, vajon a felnőtt sérült agyszövetben túlélnek és vándorolnak-
e illetve idegszövetté differenciálódnak-e ugyanezen idegi őssejtek.
I.1 NE-4C sejtek fagyasztással sértett agykérgi területeken
Kezdeti munkám során megvizsgáltam a zöld fluoreszcens fehérjét expresszáló GFP-4C
idegi őssejtek viselkedését „intakt” és fagyasztásos lézión átesett modellállatok
agyában.
A fagyasztásos sértést felnőtt egerek (n=42 db) előagykérgében idéztünk elő, Klatzo
(1958) és Murakami (1999) metódusa alapján. Ennek előnye, hogy reprodukálható
méretű károsodást eredményez. A fagyasztással elölt „magi régióban” gyors
sejtpusztulás (nekrózis-apoptózis) indul meg, míg a távolabbi, mélyebb kérgi területen
(„széli zóna”) késleltetett apoptotikus folyamatok zajlanak. A fagyasztórúd méretétől,
hőmérsékletétől és a fagyasztás időtartamától függően a magi és széli régió kiterjedése
változtatható.
Az általunk alkalmazott fagyasztásos beavatkozás 1,7 ( 0,4) mm átmérőjű félgömb
alakú sérült területet eredményezett az agykéregben, amelynek középponti koordinátáit
az alábbiakban határoztuk meg: Br: -0,7; L 2,3 mm. A műtét napját nulladik napként
(D0) jelöltük. A fagyasztásos beavatkozást követő hetedik napon (D7) a sértett és
kontroll állatok agykérgi régiójába GFP-4C idegi őssejteket ültettünk. Az időpont
kiválasztásánál döntő szempont volt, hogy kivárjuk a vazogén agyödéma lecsengését
(Murakami 1999). Az implantáció helyét és a beültetett sejtek számát előzetes
vizsgálatok alapján úgy válaszottuk meg, hogy az agykérgi sérülés fénymikroszkóposan
azonosítható nekrotikus határzónájától 1 mm-re lateralisan (Br:-0,1; L: 3,2; V: 1,4 mm),
a sértés széli zónájába kerüljön a bejuttatandó 10 5 db GFP-4C sejt (12 / A, B. ábra).
49