dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola
dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola
dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
az aggregátumban a kétféle sejttípus szegregál („sorting out”) (Steinberg 1963). Az<br />
egymással erős kölcsönhatásokat kialakító sejttípusok sejtjei elkeverednek.<br />
A kísérlet során 10 3 db NE-4C/GFP-4C sejtet és 10 3 db GL261 vagy U87 vagy C6<br />
tumorsejtet, mesenchymális őssejtet vagy GFP-vel jelölt primer egér asztrocitát<br />
egymással összekevertünk, majd 72 órán át közös függőcseppben tenyésztettük. Az<br />
elkeveredést/szegregációt a függőcseppek fixálását követően fluoreszcens mikroszkópos<br />
technikával vizsgáltuk.<br />
A GFP-4C sejtek vizsgálatainkban elkülönültek a primer asztrogliasejtektől és a C6<br />
patkány glióma, U87 humán glióma és az LL-immortalizált egér gliasejtektől. Ezzel<br />
szemben egyenletesen elkeveredtek a GL261 egér glioblasztómasejtekkel és egér<br />
mesenchymális őssejtekkel (8. táblázat). A GFP-vel jelölt primer asztrogliasejtek<br />
minden gliómasejt-típussal elkeveredtek, míg az NE-4C sejtektől szegregáltak (8.<br />
táblázat, 23. ábra). A GFP-4C őssejtek tehát kizárólag a GL261 glioblasztóma<br />
tumortípussal tudtak sejt-sejt kölcsönhatásokat létesíteni, azaz sejtfelszíni<br />
kölcsönhatásaik nem gátolták a kétféle sejt „együttélését”.<br />
8. táblázat Az NE-4C/GFP-4C őssejtek és a hGFAP-eGFP asztrogliasejtek sejt-sejt<br />
kölcsönhatásai glióma- és egyéb sejttípusokkal<br />
GFP-4C hGFAP-eGFP primer asztroglia<br />
C6 glióma Szegregáció Keveredés<br />
LL-glia Szegregáció Keveredés<br />
GL261 glioblasztóma Keveredés Keveredés<br />
U87 glióma Szegregáció Keveredés<br />
Mesenchymális őssejt Keveredés -<br />
NE-4C - Szegregáció<br />
I.2.2 Szolubilis kölcsönhatások in vitro vizsgálata<br />
Mivel az őssejtek és tumorsejtek „együttélése” folyamán mind az ős-, mind a<br />
tumorsejtek által termelt szolubilis faktorok előidézhetik a másik sejttípus<br />
proliferációjának változását, amely nem kívánt eredményt adhat (őssejt-tumor,<br />
tumorprogresszió), megvizsgáltuk, hogy az NE-4C őssejtek és egyes tumorsejtek<br />
kondícionált médiumai hogyan hatnak a sejtek proliferációjára. Ehhez NE-4C,<br />
különböző tumor és primer egér asztrocita sejteket szérummentes tápoldatban<br />
növesztettünk 24 órán át, majd a sejtek médiumba bocsátott faktorait tartalmazó<br />
„kondícionált médiumokat” (KMNE-4C, KMASZTRO, KMC6, KMGL261, KMU87) használtunk<br />
58
Change language