02.11.2012 Views

dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola

dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola

dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola

SHOW MORE
SHOW LESS

Create successful ePaper yourself

Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.

A kapott pontszámot minden csoportban átlagoltuk, meghatároztuk a szórás értékét és<br />

variancia-analízissel vizsgáltuk a csoportok közötti eltérések szignifikanciáját.<br />

Mellső végtag aszimmetria teszt<br />

Az állatokat 15 cm magas, 10 cm átmérőjű átlátszó műanyag hengerbe helyeztük. A<br />

henger felderítésekor az állatok hátsó végtagjaikra nehezedve mellső végtagjaikat a<br />

henger falának támasztották. A felderítő viselkedést videokamerával 3-5 perc hosszan<br />

rögzítettük, majd a mellső végtagok használatát, a végtagpreferenciát, az esetleges<br />

paresist, plégiát elemeztük. Az értékelésre az 5. táblázatban látható pontrendszert<br />

alkottuk meg.<br />

5. táblázat Mellső végtagi aszimmetria teszt pontrendszer<br />

4 pont Szimmetrikus<br />

3 pont Enyhén aszimmetrikus<br />

2 pont Mérsékelten aszimmetrikus<br />

1 pont Súlyosan aszmmetrikus<br />

(forog a hengerben)<br />

0 pont Hemiplegia<br />

45<br />

mellső végtagmozgások<br />

A kapott pontszámot minden csoportban átlagoltuk, meghatároztuk a szórás értékét és<br />

variancia-analízissel vizsgáltuk a csoportok közötti eltérések szignifikanciáját.<br />

C. A preparátumok feldolgozása<br />

Fixálás, metszés<br />

Az állatokat mély altatásban, szíven át perfundáltuk. A bal szívkamrán át PBS-t, majd<br />

4% PFA-t áramoltattuk át perfúzor segítségével. Az agyat a koponyaüregből<br />

eltávolítottuk, majd 4% PFA-val utófixáltuk egy napon át. Ezt követően nátrium-azidot<br />

(0,1%) tartalmazó 25%-os glükózoldatban legalább 1 napos krioprotekciót végeztünk.<br />

Fagyasztó szánkamikrotom segítségével az agyakból 30 m vastagságú úszó<br />

metszeteket készítettünk. Hat-tíz párhuzamos metszetsorozat készült minden agyról,<br />

amelyeket különböző immuncitokémiai vizsgálatokban használtunk fel. A festéseket<br />

szabadon úszó metszeteken, vagy tárgylemezre rögzített metszetek esetén, csepp-<br />

festéssel végeztük. A tenyésztőedényekben, üveglemezeken növesztett sejttenyészeteket

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!