dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola
dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola
dr. Zádori Anita - Semmelweis Egyetem Doktori Iskola
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
A kapott pontszámot minden csoportban átlagoltuk, meghatároztuk a szórás értékét és<br />
variancia-analízissel vizsgáltuk a csoportok közötti eltérések szignifikanciáját.<br />
Mellső végtag aszimmetria teszt<br />
Az állatokat 15 cm magas, 10 cm átmérőjű átlátszó műanyag hengerbe helyeztük. A<br />
henger felderítésekor az állatok hátsó végtagjaikra nehezedve mellső végtagjaikat a<br />
henger falának támasztották. A felderítő viselkedést videokamerával 3-5 perc hosszan<br />
rögzítettük, majd a mellső végtagok használatát, a végtagpreferenciát, az esetleges<br />
paresist, plégiát elemeztük. Az értékelésre az 5. táblázatban látható pontrendszert<br />
alkottuk meg.<br />
5. táblázat Mellső végtagi aszimmetria teszt pontrendszer<br />
4 pont Szimmetrikus<br />
3 pont Enyhén aszimmetrikus<br />
2 pont Mérsékelten aszimmetrikus<br />
1 pont Súlyosan aszmmetrikus<br />
(forog a hengerben)<br />
0 pont Hemiplegia<br />
45<br />
mellső végtagmozgások<br />
A kapott pontszámot minden csoportban átlagoltuk, meghatároztuk a szórás értékét és<br />
variancia-analízissel vizsgáltuk a csoportok közötti eltérések szignifikanciáját.<br />
C. A preparátumok feldolgozása<br />
Fixálás, metszés<br />
Az állatokat mély altatásban, szíven át perfundáltuk. A bal szívkamrán át PBS-t, majd<br />
4% PFA-t áramoltattuk át perfúzor segítségével. Az agyat a koponyaüregből<br />
eltávolítottuk, majd 4% PFA-val utófixáltuk egy napon át. Ezt követően nátrium-azidot<br />
(0,1%) tartalmazó 25%-os glükózoldatban legalább 1 napos krioprotekciót végeztünk.<br />
Fagyasztó szánkamikrotom segítségével az agyakból 30 m vastagságú úszó<br />
metszeteket készítettünk. Hat-tíz párhuzamos metszetsorozat készült minden agyról,<br />
amelyeket különböző immuncitokémiai vizsgálatokban használtunk fel. A festéseket<br />
szabadon úszó metszeteken, vagy tárgylemezre rögzített metszetek esetén, csepp-<br />
festéssel végeztük. A tenyésztőedényekben, üveglemezeken növesztett sejttenyészeteket