CAPA E LOMBADA - Arca - Fiocruz
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) Utilizar para o transporte caixas isotérmicas com poliuretano expandido (PUR)<br />
como elemento isolante, recoberta de polietileno de alta densidade com<br />
tampa e lacres; placas e flocos de gelo seco e monitor de temperatura<br />
contínuo, conforme especificações da Lei Nacional de Biossegurança 11.105<br />
de 24 de março de 2005;<br />
c) Monitorar continuamente a temperatura e manter arquivados estes registros<br />
para uma eventual rastreabilidade.<br />
4.3.2.2 Estocagem da célula hospedeira, plasmídeo, BCM e BCT<br />
O resfriamento é fundamental para a conservação das características<br />
genotípicas e fenotípicas das cepas de E. coli. Dessa forma, é recomendado que<br />
tanto o plasmídeo quanto as células contendo meio e crioprotetor sejam refrigerados<br />
à - 70° C.<br />
É sabido que um Banco de Células armazenado sob condições que<br />
asseguram sua estabilidade genética, evita alterações de suas características<br />
bioquímicas, bem como alterações na sua seqüência nucleotídica, na estabilidade<br />
plasmática e em suas características morfológicas. Além disso, retarda a morte dos<br />
microorganismos, previne a contaminação e mantém a viabilidade dos<br />
microorganismos (Pérez e Prieto, 2007).<br />
Um estudo realizado pela Roche Molecular Systems Culture Collection<br />
(RMSCC) mostrou que a viabilidade celular e retenção plasmidial de células<br />
recombinantes de E. coli se mantiveram constantes quando BCM´s foram estocados<br />
criogenicamente a uma temperatura de – 80°C por um período de 10 anos (Koenig,<br />
2003).<br />
Vale também ressaltar a importância dos Bancos serem estocados em<br />
separado, sempre mantendo uma cópia dos mesmos em outro lugar para evitar que<br />
algum tipo de incidente, tais como incêndio, falta de energia, etc destrua todo o<br />
Banco (Schiff, 2005).<br />
4.3.2.3 Viabilidade celular<br />
A viabilidade celular é expressa pela seguinte fórmula:<br />
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