CAPA E LOMBADA - Arca - Fiocruz

acteriano artificial – Bacterial Artificial Chromosome (BAC); e os plasmídeos
Bluescript M13+ e M13- (Zaha et al., 2003).
b) Bacteriófagos
São vírus que infectam exclusivamente bactérias, por introdução de seus
ácidos nucléicos no hospedeiro (Grilo e Magalhães, 1994). Dentre os mais utilizados
pode-se citar o fago Lambda (λ) e o fago M13 (Berg et al., 2004; Zaha et al., 2003).
O ADN do fago λ foi modificado pela tecnologia do ADN recombinante,
originando um dos mais versáteis e gerais vetores para clonagem (Zaha et al.,
2003). Após ser inserido na célula hospedeira, este fago pode multiplicar-se no
interior da mesma, causando a lise - ciclo lítico - ou integrando o seu ADN no
cromossomo do hospedeiro - ciclo lisogênico (Berg et al., 2004; Zaha et al., 2003).
O fago M13 é especialmente útil para o seqüenciamento do ADN inserido,
mas não para propagação em longo prazo de ADN recombinante, porque inserções
maiores do que cerca de 1kb não são mantidas estáveis (Berg et al., 2004). Outra
característica marcante de M13 é que ele não destrói sua bactéria hospedeira. Em
conseqüência, grandes quantidades de M13 podem ser cultivadas e facilmente
obtidas (Berg et al., 2004).
Uma vantagem de se utilizar esses vírus modificados como vetores é que eles
são inseridos na bactéria muito mais facilmente do que os plasmídeos (Berg et al.,
2004).
c) Cromossomos artificiais de leveduras
Os YACs foram desenvolvidos no final da década de 1980, como um tipo de
vetor para a levedura Saccharomyces cerevisiae, que podem clonar fragmentos
longos de ADN (Zaha et al., 2003).
Os YACs têm sido muito importantes na construção de bibliotecas genômicas
de organismos com genomas complexos, como, por exemplo, os mamíferos (Zaha
et al., 2003).
1.7.6 Criação dos Bancos de Células Recombinantes
De uma maneira simplificada, a criação dos Bancos de Células segue as
seguintes etapas:
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