CAPA E LOMBADA - Arca - Fiocruz

armazenar e transmitir ao longo das gerações, mas expressar, ou seja, servir de
molde para a síntese de Ácidos Ribonucléicos (ARNs) e alguns desses serem
traduzidos nas proteínas correspondentes (Lemes, 2007).
Com o desenvolvimento técnico e de novas abordagens moleculares, vários
avanços significativos têm sido obtidos através do isolamento, análise e síntese de
seqüência de ADN e genes. Considera-se também a introdução desses ADNs
recombinantes em células vivas para o estudo da sua função e dos mecanismos que
controlam sua expressão, produção de substâncias úteis para os seres humanos
com potencial cada vez maior de inovações e de geração de novos produtos
(Lemes, 2007).
A clonagem de genes tem um potencial enorme para o aumento da qualidade
de vida e tem gerado novos caminhos para o desenvolvimento econômico. São
inúmeros os exemplos em diversas áreas como a produção de vacinas, biofármacos,
anticorpos monoclonais entre outros (Lemes, 2007).
De forma geral os passos para a produção de uma molécula recombinante são
os seguintes:
a) Isolamento e digestão
A fonte de ADN pode ser: i. todo o ADN de um organismo usado geralmente para
isolar um gene específico, ii. ou ADN sintetizado a partir de um molde de ARN pela
enzima transcriptase reversa, iii. o ADN sintetizado in vitro a partir de nucleotídeos
(Berg et al., 2004; Lemes, 2007).
Ressalta-se que se o ADN genômico total for a fonte de ADN, ele será utilizado
para que a partir de um par de primers (iniciadores) ele possa amplificar o gene de
interesse pela técnica de Reação em Cadeia da Polimerase – PCR (Lemes, 2007).
b) Junção dos fragmentos de ADN a um vetor de expressão pela ação
da ADN ligase
Os pequenos elementos genéticos, utilizados para replicar e controlar a
expressão dos genes estão contidos nos vetores de expressão. Estes se replicam
de forma independente do ADN cromossômico quando inseridos em um
microorganismo hospedeiro, porque possuem em sua construção original elementos
genéticos independentes (Berg et al., 2004).
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