CAPA E LOMBADA - Arca - Fiocruz

Tabela 1.16 Principais testes/requerimentos a serem aplicados na célula hospedeira e no vetor de
expressão utilizados na produção de proteínas recombinantes
Célula hospedeira Vetor de expressão
descrição das características identificação, origem e fonte de obtenção da célula de onde
genotípicas e fenotípicas
o gene que codifica a proteína foi obtido
identificação e detalhes quanto ao isolamento do gene que
fonte de obtenção da célula
será clonado
histórico da célula quanto seu
emprego na produção de
métodos usados para construção do vetor
biofármacos
importantes referências
bibliográficas da literatura científica descrição detalhada da montagem do vetor
referentes à célula em questão
procedimento utilizado para o
fonte de obtenção do vetor e histórico do mesmo
cultivo
método de preservação do banco
um mapa com a descrição e seqüência relevantes do vetor
de célula hospedeira
mapa das enzimas de restrição
fonte e funções dos componentes do vetor
quais regiões do vetor foram seqüenciadas
se a proteína é expressa ou não como uma proteína de
fusão
se o vetor expressa mais de uma proteína
descrição do método de transformação/transfecção
descrição completa da forma utilizada para amplificação do
vetor
método detalhado de seleção clonal
indicação se o vetor se encontra integrado no genoma ou
extracromossomal
método de preservação do vetor
seqüenciamento do ADN da região codificante do gene de
interesse
seqüenciamento do ADN das regiões flanqueadoras e das
junções de inserção
análise quanto inserções e deleções
Fontes: criação própria baseada nos dados pesquisados em: WHO, 1991; ICH, 2002; ICH, 1995a;
ICH, 1995b; CECMED, 2000; WHO, 1988; EEC, 1990; EEC, 1994; FDA, 1997; USP, 2008,
Farmacopéia Britânica, 2007
57