Formas farmacêuticas semi-sólidas de uso tópico contendo ... - UFRJ

4.2.6.4 Método em Microscopia de LuzSegmentos cutâneos, epiderme e derme, separados com auxílio de bisturi foram eprocessados seguindo-se a técnica histológica para inclusão em parafina. O material foifixado em formol neutro tamponado (por 1 semana) e/ou líquido de Bouin (por 18horas). Após o período de fixação para cada fixador, os fragmentos foram lavados emantidos em álcool 70%. A seguir, os fragmentos foram desidratados utilizando-seconcentrações crescentes de álcool etílico (70%, 80%, 90% e 100% - um banho de 20min. em cada álcool). Após a desidratação, o material foi clarificado em dois banhossucessivos de xilol (15 minutos cada), posteriormente impregnado, utilizando-se doisbanhos de parafina (15 minutos cada) em seguida o fragmento foi emblocado emparafina.Cortes histológicos de 5 µm de espessura foram obtidos com o auxílio de ummicrótomo “American Optical” modelo Spencer 45, sendo coletados em lâminashistológicas e guardados em estufa a 37ºC durante 24 h para secagem.A análise morfológica foi realizada, utilizando-se a coloração pela hematoxilinaeosina(Lillie e Fullmer, 1976): os cortes foram desparafinizados em três banhos dexilol, hidratados em uma série de concentrações decrescentes de álcool etílico (100%,90%, 80% e 70%) e lavados em água destilada. Procedeu-se à coloração pelahematoxilina de Harris, por 10 segundos, que foi seguida de lavagem em água correntepor 5 minutos. Posteriormente, os cortes foram submetidos à coloração pela eosina,durante 15 segundos. Após rápida lavagem em água destilada, os cortes foramdesidratados em álcool etílico (70%, 80%, 90% e 100%), clarificados em três banhos de99