DETECCIÓN DE BACTERIOCINAS EN ADN EXTRACROMOSOMAL DE BACTERIAS AISLADAS DE UN CONSORCIO MICROBIANO TIPO KEFIR presentaron plásmido, las cepas 2,3,5,7,9,10,11,12, 13 y 14 presentaron plásmido con tamaños superiores a 2000 pb. Listereria (Sarantinopoulos et al. 2002; Iseppi et al. 2008), mientras que la plantaricina ha sido empleada en salchichas para evitar la contaminación por Aereomonas hydrophila (Messi et al., 2001). Figura 2. Fraccionado de los productos de la extracción plasmídica de cepas aisladas del consorcio microbiano. Carriles: 1, cepa 1; carril 2, cepa2; carril 3, cepa 3; carril 4, cepa 5; carril 6, cepa 8; carril 7, escalera molecular de 50 pb; carril 8, cepa 9; carril 9, cepa 10; carril 9, cepa 11; carril 11, cepa 12; carril 12, cepa 14 y carril 13, cepa 14. -7; 9-14. Gel de agarosa al 2% teñido con bromuro de etidio 10 mg.mL -1 A partir de estos plásmidos se realizó la reacción en cadena de la polimerasa a fin de determinar si en estos plásmidos se encuentra información de bacteriocinas, para esto se emplearon cebadores que amplifican regiones de ADN pertenecientes a las bacteriocinas enterocina, plantaricina pertenecientes a la clase II de bacteriocinas y un juego de cebadores degenerados basado en al alineamiento de secuencias de bacteriocinas del grupo IIa. Se realizó la amplificación para las cepas 2, 5 y 9. Como se muestra en la figura 3. Los plásmidos de las cepas 5 dieron positivo para plantaricina y cebadores degenerados, los plásmidos de la cepa 9 dieron positivo para plantaricina y enterocina. No se obtuvo amplificación al utilizar el ADN cromosomal, lo cual sugiere que las bacteriocinas de este tipo son de origen extracromosomal. La clase II son péptidos pequeños termoestables (
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