MEDICINA NUCLEARE - Crosetto Foundation

Il DAT è uno dei target a più alta densità identificato per la diagnostica per immagini e quest’ultima può
essere ancora efficace nel caso di legami così deboli con una Kd di 10nM.
Per il [ 18 F]fallypride, il rapporto Bmax/Kd determinato in vitro (in un range compreso fra 900 e 30) è
stato osservato in vivo in un range da 24 a 2 [24]. Ciò riflette la supplementare complessità in vivo
paragonata agli esperimenti in vitro dove metabolismo, legame proteico, flusso e permeabilità non sono
fattori di confusione.
Tabella 3
Costanti di affinità, densità dei transporter e il rapporto Bmax/Kd per i transporter nel cervello di ratto ( ref. [7]).
Bmax fmol/mg proteina (nM)* Kd (nM) Composto Bmax/Kd
DAT 2000 (200) [corpo striato del ratto] 10 [ 99m Tc]TRODAT 20
SERT 194 (19.4) [corteccia frontale del ratto] 0.13 [ 125 I]ADAM 149
NET 55 (5.5) [corteccia frontale del ratto] 0.05 2-[ 125 I]INXT 110
TRODAT: tecnezio, 2-[[2-[[[3-(4-clorofenil)-8-metil-8-azabiciclo[3.2.1]oct-2-yl]metil](2-mercaptoetil)amino]etil]amino]-etanoetiolato(3)-oxo-[1R-(exo-exo)].
ADAM: 2-[2-(dimetilaminometil-feniltiol)]-5-[ 125I]iodofenilamina. INXT: (R)-N-metil-(2-[ 125I]iodo-fenossi)-3-fenilpropilamina.
*assumendo 10% di proteine per grammo di tessuto.
L`USO DI TOPI GENETICAMENTE MODIFICATI (Knockout) PER SOSTENERE LA
SPECIFICITA` DEI SOTTOTIPI.
La tradizionale dimostrazione farmacologica per un radiotracciante in grado di legare un sottotipo
recettoriale (ad esempio l`uso di maggiori e crescenti dosi di farmaci sottotipo-specifici) può non essere
convincente se le dosi inibenti causano modificazioni del flusso ematico, della permeabilità, del
metabolismo e di ogni altra proprietà farmacocinetica in grado di alterare la biodistribuzione. L`uso di
topi knockout è stato molto efficace nella predizione e validazione del targeting verso un sottotipo
recettoriale ma lo è stato meno nel fungere da modello per patologia. Zambrowicz e Sands [25] hanno
riesaminato i farmaci di maggior mercato nel 2001 ed hanno trovato che essi erano capaci di targeting
verso 43 proteine tra le oltre 500 utilizzabili come farmaci individuate in era pregenomica. Oltre 20
radioligandi sono stati validati usando i topi knockout per determinare il legame a specifici sottotipi
recettoriali [26].
Il composto radiomercato 3-(3-(3-fluoropropil)tio)-1,2,5-(tiadiazol-4-il)-1,2,5,6-tetraidro-1-metilpiridina
([ 18 F]FP-TZTP) rappresenta un esempio del ruolo del modello fornito da topi knockout perchè il sottotipo
recettoriale muscarinico-2 (M2) è distribuito in maniera omogenea nella sostanza grigia e non ci sono
agonisti ad alta affinità che possono essere utilizzati per inibire il legame. Per di più, studi di legami
competitivi che usano agonisti non radioattivi possono indurre cambiamenti farmacologici [27].
Visto che il più ampio decremento nell’uptake cerebrale di [ 18 F]FP-TZTP è stato osservato solo negli M2
knockout rispetto a topi wild-type (WT) ma non in topi knockout per altri sottotipi recettoriali, il [ 18 F]FP-
TZTP preferenzialmente si lega a recettori M2 in vivo. I topi knockout sono un strumento prezioso per
convalidare la selettività verso un sottotipo e restano una grande promessa per accelerare la validazione
dei radioligandi [28].
TESSUTI CON O SENZA MISURABILE DENSITA’ DI TARGET
Uno dei metodi chiave per determinare la densità del target è incorporare il rapporto della radioattività nel
target verso il tessuto che non abbia una misurabile densità del target. In molti casi, il cervelletto non
contiene proteine target e per esempio è privo di recettori per la dopamina D2 e recettori 5-HT1A. In
questi casi, il cervelletto può essere usato come tessuto di riferimento ed un decremento nella regione
target del cervello rispetto al cervelletto, come funzione dell’aumentato ligando non radioattivo per lo
stesso recettore, convalida la specificità e la saturabilità del legame al recettore [29,30] .
AIMN - Notiziario elettronico di Medicina Nucleare ed Imaging Molecolare, Anno V, n 2, 2009 pag. 13/85