Ocena przydatności oznaczania prohepcydyny w przebiegu ...

2 probówek (morfologia krwi obwodowej z retikulocytozą i wzorem odsetkowym
krwinek białych oraz oznaczenia biochemiczne). Oznaczenia w grupie badanej
wykonywano w dwóch seriach. Pierwsza seria oznaczeń wykonywana na początku
hospitalizacji miała na celu ocenę wyjściowego stęŜenia prohepcydyny w odniesieniu
do zakaŜenia i zasobów Ŝelaza. W drugiej serii oznaczeń oceniano stęŜenie
prohepcydyny po ustąpieniu ostrego stanu zapalnego i wpływ ewentualnej
niedokrwistości i niedoboru Ŝelaza na ten parametr. W załoŜeniu odstęp między
oznaczeniami miał wynosić co najmniej 7 dni, ale ze względów etycznych i z powodu
krótkiego średniego czasu hospitalizacji w oddziale powtórne oznaczenia wykonywano
łącznie z badaniami kontrolnymi oceniającymi skuteczność leczenia zakaŜenia, to
znaczy bezpośrednio przed wypisem dziecka z oddziału.
Wykonywane badania laboratoryjne:
1. Morfologia krwi obwodowej ze wzorem odsetkowym krwinek białych (poza
jednym przypadkiem wzory odsetkowe były oceniane manualnie pod mikroskopem)
i retikulocytozą (zakresy referencyjne przedstawiono we wstępie).
2. StęŜenie białka C-reaktywnego w surowicy krwi oznaczane metodą
immunoturbidymetryczną ze wzmocnieniem cząstkami lateksu. Przeciwciała anty-CRP
związane z mikrocząstkami lateksu reagują z obecnym w próbce antygenem, tworząc
kompleks antygen-przeciwciało. Pojawiająca się aglutynacja mierzona jest
turbidymetrycznie. Zakres referencyjny < 0,5 mg/dl (analizator Modular PP800 firmy
Roche).
3. StęŜenie ferrytyny w surowicy krwi oznaczane metodą turbidymetryczną.
Związane z lateksem przeciwciała przeciwko ferrytynie reagują z obecnym w próbce
antygenem z utworzeniem kompleksu antygen-przeciwciało. Pojawiająca się
aglutynacja mierzona jest turbidymetrycznie. Zakres referencyjny: 1 dzień-1 miesiąc
150-450 ng/ml, 2-3 miesiące 80-500 ng/ml (analizator Modular PP800 firmy Roche).
4. StęŜenie Ŝelaza w surowicy krwi oznaczane metodą kolorymetryczną.
W środowisku kwaśnym Ŝelazo uwalniane jest z połączenia z transferyną. Askorbinian
redukuje uwolnione jony Fe 3+ do Fe 2+ , które następnie reagują z ferrozyną, tworząc
barwny związek. NatęŜenie barwy powstałego produktu jest wprost proporcjonalne do
stęŜenia Ŝelaza i jest mierzone fotometrycznie. Zakres referencyjny: kobiety 37-145
µg/dl, męŜczyźni 59-158 µg/dl (analizator Modular PP800 firmy Roche).
57