Sabato 27 ottobre 2012 - Pacini Editore

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Anatomia Patologica scegliere quella più adatta alla propria
organizzazione.
Utilizzando il processo lavorativo dell’Istologia si possono
identificare con facilità i punti critici più soggetti ad errore e
adottare quindi i correttivi appropriati.
Un punto di partenza molto importante è sicuramente il cosiddetto
“order entry”, cioè una richiesta inviata per via informatica
riportante i dati anagrafici del paziente, materiale, sede
del prelievo, ecc. inviata via web direttamente dal reparto richiedente.
In questo modo si eliminano gli errori in fase di accettazione
dovuti a errori di trascrizione e/o di interpretazione.
A questo punto si acquisiscono i dati e si producono sia il
foglio di lavoro che le etichette da apporre ai contenitori riportanti
il corrispondente n° istologico e il codice 2D, che verrà
richiamato per tutte le fasi lavorative utilizzando una penna
ottica. Sicuramente questo è un punto fondamentale per la
sicurezza del paziente.
Un altro punto importamte è l’utilizzo di stampigliatrici collegate
con il sistema operativo sia per le bio-cassette che per i
vetrini che riporteranno sempre il codice 2D.
In seguito tutto il flusso di lavoro dall’accettazione, campionamento,
processazione, inclusione, taglio, colorazione,
consegna al Medico, ulteriori colorazioni e/o indagini speciali,
viene monitorato e “tracciato” in modo che se si verifica
un’errore, il sistema si blocca e andando a verificare l’incongruenza
è possibile rilevare le non conformità e apportare
subiti gli opportuni correttivi. Ogni operatore per tutte le fasi
lavorative utilizzerà la propria password e in questo modo
viene anche tracciato il “chi fa che cosa”.
Anche tutte le altre strumentazioni utilizzate per colorazioni
e/o indagini speciali possono essere interfacciate con il
sistema operativo in uso, in modo da seguire tutto il flusso
lavorativo.
Una volta consegnato l’esame al Patologo, anche per la lettura
del vetrino e la diagnosi viene utilizzato il codice 2D, in modo
da evitare anche in questa fase errori di scambio tra i vetrini.
In conclusione l’utilizzo dei codici 2D utilizzati nel sistema
gestionale del Servizio, permette di avere tutta la tracciabilità
completa dell’esame durante tutto l’iter lavorativo diminuendo
sensibilmente il margine d’errore in favore della sicurezza
del paziente.
Identificando gli attori dei singoli processi si aumenta il grado
di responsabilità permettendo di verificare la performance
professionale e di ricorrere a correttivi qualora gli errori (mai
azzerabili) si ripetano con una certa frequenza. Permettono
infine un controllo dei carichi di lavoro in modo del tutto
oggettivo identificando eventuali carenze lavorative che altrimenti
sarebbero difficilmente identificabili.
Sperimentazione tecnica e qualità del
preparato istologico: percorso metodologico
nel laboratorio di anatomia patologica
M. Cadei, P.G. Grigolato
Cattedra di Anatomia Patologica II, Università di Brescia
Nel laboratorio di Anatomia Patologica l’allestimento
dei campioni istologici è rimasto pressoché inalterato nel
tempo e dalla fissazione alla processazione dei campioni
istologici, la principale implementazione metodologica
è stata legata alla innovazione strumentale (processatori,
coloratori ecc.).
Da qualche tempo, anche in conseguenza all’introduzione
della legislazione sulla sicurezza è stata posta attenzione
anche riguardo all’utilizzo di sostanze che, da sempre con-
CONGRESSO aNNualE di aNatOmia patOlOGiCa SiapEC – iap • fiRENzE, 25-27 OttOBRE 2012
siderate indiscutibili (formalina, xilolo, alcool), hanno invece
cominciato a trovare sul mercato validi concorrenti.
Se indubbiamente questo merito è da riconoscere alle Aziende
del settore che hanno fortemente sviluppato la ricerca di possibili
prodotti non tossici in grado di competere con i reagenti
tradizionali, c’è da dire che in molti laboratori si è assistito ad
una maggiore apertura rispetto a prodotti non convenzionali.
La nostra sperimentazione, iniziata qualche anno fa con
l’utilizzo di “prodotti alternativi” della fissazione dei tessuti
di origine murina, si è perfezionata nel tempo con la sperimentazione
su tessuti umani di routine giunti presso il nostro
Servizio per la diagnosi istopatologica. Oggetto del nostro
studio sono stati la valutazione morfologica del preparato
istologico, le tecniche istochimiche ed immunoistochimiche,
l’analisi citofluorimetrica le indagini bio-molecolari, che ad
oggi sempre più frequentemente vengono richieste ad integrazione
della diagnostica.
L’esperienza, finalizzata a dimostrare l’esistenza sul mercato
di un prodotto adatto alle attuali esigenze normative, di buona
qualità morfologica ed adeguato alle necessità metodologiche
più evolute, dovrà essere completata con ulteriori miglioramenti
tecnici e l’ottimizzazione per un possibile utilizzo
routinario di laboratorio.
Tecniche di diagnostica molecolare: attualità e
nuove prospettive
C. Lupo
Casa di Cura di Alta Specialità La Maddalena, Palermo
La diagnostica molecolare in Anatomia Patologica gioca un
ruolo fondamentale nella gestione del paziente oncologico.
L’impiego di tecniche molecolari, finalizzate alla detection di
target specifici, a corredo della diagnosi anatomopatologica,
permette la stratificazione dei pazienti in sottogruppi e di conseguenza
la scelta della terapia più appropriata per ciascuno.
Sappiamo che i test di diagnostica molecolare non possono
prescindere da un corretto management del campione istologico
e citologico finalizzato all’analisi molecolare. Le procedure
interne di ciascun laboratorio identificano e definiscono il
“workflow” del precorso tecnico-diagnostico. In quest’ottica
è fondamentale individuare ed eliminare le variabili preanalitiche
ed analitiche che possono condizionare pesantemente
il dato molecolare. Un altro punto imprescindibile per questo
tipo di diagnostica è il concetto di “idoneità” del materiale
da analizzare. Poiché l’idoneità del campione da analizzare
condiziona pesantemenmte il dato molecolare, in questa fase
risulta essenziale la figura dell’anatomopatologo. Altrettanto
importante è la competenza e l’esperienza dello staff dedicato.
Grazie all’impiego di tecniche di diagnostica molecolare si
eseguono test predittivi di risposta al farmaco. Nella terapia
mirata dei tumori solidi ad esempio, troviamo test, che oramai
fanno parte della diagnostica di routine, quali le analisi delle
mutazioni del gene K-RAS nel carcinoma del colon-retto, del
gene BRAF nel melanoma metastatico, del gene EGFR nel
carcinoma non a piccole cellule del polmone (NSCLC). Per
lo studio delle mutazioni dei geni sopra descritti è necessario
estrarre il DNA genomico dal tessuto tumorale fissato in
formalina ed incluso in paraffina o da campioni citologici. Il
DNA estratto è poi analizzato attraverso diverse tecniche tra
le quali, ad esempio, la PCR Real-Time, TaqMelt Real-time
PCR, il sequenziamento diretto ed il pirosequenziamento.
Di recente, nel carcinoma non a piccole cellule del polmone
(NSCLC), si esegue lo studio del riarrangiamento del gene
ALK. La valutazione di ALK si può effettuare mediante l’im-