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L’infection au virus du papillome humain (VPH)
Le test Hybrid Capture II (HC-II) détecte plus de génotypes VPH (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52,
56, 58, 59 et 68) et sa sensibilité est semblable au PCR. Le format du test permet l’automatisation et
l’utilisation sur une grande échelle. Le test HC II est un test performant qui nécessiterait une expertise
moindre que la cytologie (Terry 2001). À l’heure actuelle le test HC-II est le seul test VPH disponible
dans le commerce (Cuzick 1999a) et la méthode permet un enseignement et contrôle de qualité faciles
(Coutlée, communication personnelle).
Le PCR (réaction de polymérisation en chaîne) permet la réplication (amplification) de l’ADN par une
technique répétitive de dénaturation, hybridation avec des amorces complémentaires et synthèse
d’ADN. La méthode nécessite des quantités minimales d’ADN et la sensibilité et spécificité sont
élevées. Les PCR de détection de l’infection au VPH utilisent des amorces (primers) de consensus qui
sont capables d’amplifier un grand nombre de génotypes de VPH. Les PCR de consensus les plus
utilisés sont le protocole MY09/MY11, GP5+/GP6+, SPF et PGMY. Le PCR MY09/MY11 est moins
sensible pour le VPH 35 et il y a des variations entre les lots. La nouvelle variante de la méthode,
PGMY09/11, a une meilleure sensibilité, particulièrement pour les VPH 35, 52 et 56 (Coutlée 2002).
Le GP5+/GP6+ détecte mieux les VPH 43, 35 et 44 (Bauer 1992) mais il est moins sensible pour les
VPH 53 et 61 ainsi que pour les infections multiples. Le PCR PGMY ainsi que le SPF ont une
meilleure reproductibilité grâce à l’absence de l’utilisation des amorces dégénérées (van Doorn 2002)
et sont intégrés dans un format non-isotopique de typage (line dot et line probe) selon un protocole
standardisé et utilisent des réactifs standardisés. La reproductibilité intra-laboratoire, inter-laboratoire
et la précision de ces tests sont excellentes pour la détection et le typage des VPH (Coutlée,
communication personnelle). Toutefois, avec une sensibilité analytique plus élevée que le test HC II,
les PCR PGMY et SPF ont possiblement une spécificité moindre (Coutlée, communication
personnelle).
La détection des produits d’amplification peut être automatisée, permettant l’analyse rapide de
nombreux échantillons (Cuzick 1999a). Le problème majeur du PCR serait son risque élevé de
contamination, pouvant occasionner des résultats faussement positifs, (Villa 2000, Cuzick 1999a) et la
nécessité de laboratoires spécialisés (Cuzick 1999).
Une nouvelle méthode de détection et génotypage des VPH est le DNA Chip. Cette méthode, encore
sous évaluation, utilise le produit d’amplification du PCR et peut identifier 22 génotypes du VPH (Im
2001). La sensibilité et spécificité du DNA Chip, comparé au test HC-II, sont de 100 % et 98 %, avec
une correspondance de 98,6 % (Im 2001). D’autres possibilités futures sont la quantification des VPH
oncogènes par PCR en temps réel, la détection de VPH intégrés et le niveau d’activité
transcriptionnelle (ARNm) des VPH oncogènes, mesuré par RT-PCR (Coutlée, communication
personnelle).
La détection des VPH est fortement affectée par la qualité de l’échantillon en termes de quantité de
cellules. Seuls les PCR incluent un contrôle du contenu en cellules de l’échantillon (Coutlée,
communication personnelle).
Institut national de santé publique du Québec 33