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Studio dell'aggregazione cellulare in ceppi vinari di Saccharomyces ...

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cerevisiae, le quali <strong>in</strong>teragiscono l’una con l’altra durante la coniugazione<br />

per favorire l’adesione delle cellule <strong>di</strong> “mat” opposto, le <strong>in</strong>terazioni tra le<br />

due agglut<strong>in</strong><strong>in</strong>e sono altamente specie-specifiche (Burke et al., 1981;<br />

Boeke et al., 1984; Roy et al., 1991). L’ a-agglut<strong>in</strong><strong>in</strong>a è composta da una<br />

prote<strong>in</strong>a <strong>di</strong> parete <strong>di</strong> 73 kDa (il prodotto genico <strong>di</strong> AGA1) (Roy et al., 1991)<br />

e da un piccolo peptide <strong>di</strong> 69 am<strong>in</strong>oaci<strong>di</strong> che contiene un ponte <strong>di</strong>-solfuro<br />

(prodotto genico <strong>di</strong> AGA2) (Watzele et al, 1988; Cappellaro et al., 1991;<br />

Cappellaro et al., 1994), la sua s<strong>in</strong>tesi è <strong>in</strong>dotta da un feromone prodotto<br />

dal partner <strong>di</strong> mat<strong>in</strong>g opposto (Betz et al., 1978; Fehrenbacher et al.,<br />

1978; Doi et al., 1979; Yanagishima, 1984). AGA1 è il gene che non ha<br />

mostrato variabilità, <strong>in</strong>fatti il 100% dei <strong>ceppi</strong> analizzati ha presentato un<br />

amplicone <strong>di</strong> 1180 bp. Questo target molecolare rivela l’esistenza <strong>di</strong> una<br />

assoluta stabilità <strong>di</strong> sequenza all’<strong>in</strong>terno del gruppo <strong>di</strong> <strong>ceppi</strong> autoctoni<br />

isolati da v<strong>in</strong>i florizzati sar<strong>di</strong>.<br />

DAN4 è localizzato sul cromosoma X e appartiene al gruppo <strong>di</strong> geni<br />

DAN/TIR, che co<strong>di</strong>ficano per mannoprote<strong>in</strong>e <strong>di</strong> parete, e vengono espressi<br />

<strong>in</strong> con<strong>di</strong>zioni <strong>di</strong> anaerobiosi (Sertil et al., 1997; Abramova et al., 2001;<br />

Cohen et al., 2001). L’amplificazione <strong>di</strong> DAN4 ha generato 6 <strong>di</strong>versi<br />

prodotti, <strong>di</strong> taglia compresa tra 1050 e 1600 bp (1050; 1200; 1250; 1400;<br />

1450; 1600). La capacità <strong>di</strong> questo gene <strong>di</strong> caratterizzare i <strong>ceppi</strong> v<strong>in</strong>ari<br />

all’<strong>in</strong>terno della popolazione analizzata è da considerare alta: <strong>in</strong>fatti sono<br />

stati ottenuti 6 <strong>di</strong>versi profili, tre dei quali a due bande. Per tale motivo,<br />

l’attività <strong>di</strong> espansione e contrazione dei m<strong>in</strong>isatelliti all’<strong>in</strong>terno del gene<br />

DAN4, consente <strong>di</strong> utilizzare il gene come marcatore molecolare per la<br />

biotipizzazione all’<strong>in</strong>terno della specie considerata (Mar<strong>in</strong>angeli et al.,<br />

2004).<br />

HSP150 è localizzato, come DAN4, sul cromosoma X. HSP150 appartiene<br />

al gruppo <strong>di</strong> geni che co<strong>di</strong>ficano per le “heat shock prote<strong>in</strong>”, <strong>in</strong> particolare<br />

co<strong>di</strong>fica per una glicoprote<strong>in</strong>a regolata da “heat stress”, O-glicosilata e<br />

secreta nel mezzo <strong>di</strong> sviluppo del microrganismo (Russo et al., 1991).<br />

L’amplificazione del gene ha fornito 1 solo prodotto <strong>di</strong> 890 bp. Perciò,<br />

P<strong>in</strong>na Clau<strong>di</strong>a<br />

103<br />

<strong>Stu<strong>di</strong>o</strong> dell’aggregazione <strong>cellulare</strong> <strong>in</strong> <strong>ceppi</strong> v<strong>in</strong>ari <strong>di</strong> <strong>Saccharomyces</strong> cerevisiae<br />

Tesi <strong>di</strong> Dottorato <strong>in</strong> Biotecnologie Microbiche Agroalimentari<br />

Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Sassari

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