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Studio dell'aggregazione cellulare in ceppi vinari di Saccharomyces ...

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0,35<br />

0,3<br />

0,25<br />

0,2<br />

0,15<br />

0,1<br />

0,05<br />

tentativo <strong>di</strong> <strong>in</strong>crementare la massa <strong>cellulare</strong> del biofilm. I biofilm sono stati<br />

raccolti dopo una settimana, filtrati e seccati <strong>in</strong> stufa. Il peso secco del<br />

biofilm è stato determ<strong>in</strong>ato per ciascun ceppo e i valori sono riportati nella<br />

figura sottostante.<br />

0<br />

M12 M23 V23 M25 M49 M46 M66 V30 V44 A9 A43 A51 M39 V19 V16 A28 A41 V80 V99 A68 V75<br />

Figura 37 . Quantificazione del biofilm formato su superficie liquida. Il grafico mostra i valori,<br />

espressi <strong>in</strong> grammi, del peso secco dei biofilm formati nell’<strong>in</strong>terfaccia aria-liquido dai <strong>ceppi</strong> flor <strong>di</strong><br />

S. cerevisiae. L’ord<strong>in</strong>e dei <strong>ceppi</strong> rispetta l’ord<strong>in</strong>e crescente <strong>di</strong> <strong>di</strong>mensione delle zone ripetute del<br />

gene FLO11.<br />

Crescita <strong>in</strong>vasiva e adesione all’agar<br />

Per valutare le due componenti legate allo sviluppo <strong>in</strong>vasivo, il<br />

comportamento dei <strong>ceppi</strong> flor è stato analizzato sia su terreno ricco<br />

agarizzato, sia su substrato costituito solo da acqua e agar al 2%. Tra i<br />

<strong>ceppi</strong> cresciuti per tre giorni su YEPD sono state riscontrate notevoli<br />

<strong>di</strong>fferenze <strong>di</strong> capacità <strong>di</strong> crescita <strong>in</strong>vasiva che presc<strong>in</strong>dono dalla<br />

<strong>di</strong>mensione del gene FLO11 e dei dom<strong>in</strong>i ripetuti: i <strong>ceppi</strong> V80 e V99 pur<br />

possedendo zone ripetute lunghe (3,1 Kb), non sono <strong>in</strong>vasivi al pari del<br />

ceppo S288c utilizzato come controllo negativo. Per i <strong>ceppi</strong> M12, M23 e<br />

V23 che posseggono sequenze <strong>in</strong>terne <strong>di</strong> piccola taglia (0,9 Kb per M12 e<br />

M23 e 1,5 Kb per V23), l’<strong>in</strong>tensità del fenomeno è risultata <strong>in</strong>feriore<br />

rispetto a quella determ<strong>in</strong>ata per gli altri <strong>ceppi</strong> con sequenze <strong>di</strong> lunghezza<br />

maggiore (fig.38). Nei <strong>ceppi</strong> V16, A28, A41, A68 e V75, per i quali sono<br />

state trovate le maggiori taglie <strong>di</strong> FLO11, i lavaggi con l’acqua non hanno<br />

asportato il materiale <strong>cellulare</strong> denotando una spiccata <strong>in</strong>vasività delle<br />

P<strong>in</strong>na Clau<strong>di</strong>a<br />

<strong>Stu<strong>di</strong>o</strong> dell’aggregazione <strong>cellulare</strong> <strong>in</strong> <strong>ceppi</strong> v<strong>in</strong>ari <strong>di</strong> <strong>Saccharomyces</strong> cerevisiae<br />

Tesi <strong>di</strong> Dottorato <strong>in</strong> Biotecnologie Microbiche Agroalimentari<br />

Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Sassari<br />

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