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Studio dell'aggregazione cellulare in ceppi vinari di Saccharomyces ...

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cariotipici determ<strong>in</strong>ati <strong>in</strong> un precedente lavoro (P<strong>in</strong>na, 2000), per un’ampia<br />

popolazione <strong>di</strong> <strong>ceppi</strong> flor isolati dalle stesse zone vitiv<strong>in</strong>icole. Tramite<br />

elettroforesi <strong>in</strong> campo pulsato (PFGE), nell’ambito <strong>di</strong> tale stu<strong>di</strong>o, è stato<br />

possibile caratterizzare cariotipicamente i <strong>ceppi</strong>, sud<strong>di</strong>viderli <strong>in</strong> gruppi ed<br />

evidenziare che <strong>in</strong> ogni zona sono presenti dei <strong>ceppi</strong> con cariotipo<br />

specifico (P<strong>in</strong>na, 2000). Partendo da questi dati, il confronto dei pattern<br />

molecolari ottenuti con le due analisi (PFGE e m<strong>in</strong>isatelliti), permette <strong>di</strong><br />

giungere a un comune risultato: ogni tipologia <strong>di</strong> profilo identificata con la<br />

tecnica dei m<strong>in</strong>isatelliti, corrisponde a un <strong>di</strong>verso cariotipo <strong>in</strong><strong>di</strong>viduato con<br />

la PFGE<br />

La caratterizzazione della popolazione <strong>di</strong> <strong>ceppi</strong> flor con la tecnica dei<br />

m<strong>in</strong>isatelliti, ha rivelato l’esistenza <strong>di</strong> un buon polimorfismo dei geni<br />

considerati anche se tale fenomeno è risultato <strong>in</strong>feriore rispetto a quanto<br />

riportato da Mar<strong>in</strong>angeli et al. (2004).<br />

Con i profili ottenuti per i geni AGA1 e HSP150, tra la popolazione degli<br />

isolati sar<strong>di</strong> non è stato possibile <strong>in</strong><strong>di</strong>viduare alcun tipo <strong>di</strong> variabilità. Il dato<br />

più <strong>in</strong>teressante è stato <strong>in</strong>vece ottenuto dall’analisi molecolare con i<br />

m<strong>in</strong>isatelliti <strong>di</strong> DAN4 e SED1: con un totale <strong>di</strong> otto profili <strong>in</strong><strong>di</strong>viduati, il loro<br />

potere <strong>di</strong>scrim<strong>in</strong>ante è da considerare molto elevato.<br />

Questi risultati evidenziano che la biotipizzazione, fatta specificamente<br />

costruendo il profilo comb<strong>in</strong>ato dei 4 m<strong>in</strong>isatelliti per ogni ceppo<br />

analizzato, può essere utilizzato come valido strumento <strong>di</strong> monitoraggio e<br />

tracciabilità dei <strong>ceppi</strong>.<br />

Amplificazione <strong>di</strong> FLO11 e delle zone <strong>in</strong>trageniche ripetute<br />

Flo11p è una glicoprote<strong>in</strong>a presente sulla superficie <strong>cellulare</strong> <strong>di</strong> S.<br />

cerevisiae, co<strong>in</strong>volta <strong>in</strong> una serie <strong>di</strong> fenotipi adesivi quali flocculazione<br />

(Guo et al., 2000; Lo and Drang<strong>in</strong>is, 1998), adesione alle superfici <strong>in</strong>erti<br />

tipo agar e plastica (Gaur and Klotz, 1997; Lo and Drang<strong>in</strong>is, 1998;<br />

Reynolds and F<strong>in</strong>k, 2001), crescita <strong>in</strong>vasiva e sviluppo pseudoifale (Guo<br />

et al., 2000; Lambrechts et al., 1996; Lo and Drang<strong>in</strong>is, 1996, 1998) e<br />

P<strong>in</strong>na Clau<strong>di</strong>a<br />

105<br />

<strong>Stu<strong>di</strong>o</strong> dell’aggregazione <strong>cellulare</strong> <strong>in</strong> <strong>ceppi</strong> v<strong>in</strong>ari <strong>di</strong> <strong>Saccharomyces</strong> cerevisiae<br />

Tesi <strong>di</strong> Dottorato <strong>in</strong> Biotecnologie Microbiche Agroalimentari<br />

Università degli Stu<strong>di</strong> <strong>di</strong> Sassari

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