Studio dell'aggregazione cellulare in ceppi vinari di Saccharomyces ...

esponsabile della formazione di biofilm, ma anche che i due domìni N-
terminale e C-terminale sono coinvolti nel fenomeno.
Nel trasformante BY-M23+ le zone ripetute misurano 900 bp mentre nei
ceppi BY-V23+ e BY-A9+ sono lunghe rispettivamente 1500 e 2600 bp. Le
tre ORF sono controllate dallo stesso promotore inducibile: si può perciò
supporre che i livelli di espressione siano uguali nei tre trasformanti. Per
tale ragione, differenze nella capacità di formare biofilm su superfici
liquide, potrebbero dipendere esclusivamente dalle dimensioni della
proteina di ciascun ceppo. Tuttavia nel il ceppo BY-V23+ la quantità di
biofilm rilevata è stata inferiore alle attese: questo risultato potrebbe in
parte dipendere dalla difficoltà incontrata nel recuperare biofilm sottili e
poco compatti.
Sebbene siano state postulate varie teorie sulle cause della risalita in
superficie dei lieviti flor (Cantarelli and Martini, 1969; Imura et al., 1980;
Farris et al., 1993; Zara et al., 2005), il fenomeno resta ancora da chiarire.
In questo lavoro si dimostra che la proteina Flo11 derivata da un ceppo
naturale, quando espressa in un ceppo di laboratorio, consente la
formazione del biofilm superficiale. Questo risultato è stato raggiunto con
tre varianti alleliche di FLO11 derivate da ceppi vinari.
Crescita invasiva
Quando si verificano limitazioni nutrizionali le cellule aploidi di S.cerevisiae
subiscono una transizione dimorfica e passano da un aspetto lievitiforme il
cui sviluppo avviene sulla superficie dell’agar, a uno sviluppo invasivo, nel
quale le catene cellulari penetrano nel terreno agarizzato. La crescita
invasiva è indicata come un importante meccanismo di sopravvivenza che
consente ai lieviti di permanere in ambienti poveri di nutrienti (Gancedo,
2001). In precedenti lavori è stato dimostrato come un incremento di
espressione di FLO11 sia sufficiente a indurre lo sviluppo invasivo in
cellule aploidi del ceppo Σ1278b (Lo and Dranginis, 1998; Li and Palecek,
2003). I trasformanti ottenuti in questo studio e il ceppo genetico BY4742,
testati in parallelo per la crescita invasiva, hanno mostrato l’incapacità di
Pinna Claudia
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Studio dell’aggregazione cellulare in ceppi vinari di Saccharomyces cerevisiae
Tesi di Dottorato in Biotecnologie Microbiche Agroalimentari
Università degli Studi di Sassari