(UV) ve Görünür Bölge Moleküler Absorpsiyon Spektroskopisi
(UV) ve Görünür Bölge Moleküler Absorpsiyon Spektroskopisi
(UV) ve Görünür Bölge Moleküler Absorpsiyon Spektroskopisi
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
fliddetinin zamana karfl› çizilen grafi¤inin integre edilmesiyle elde edilen alan de-<br />
¤erleri <strong>ve</strong>ya bu e¤rinin yüksekli¤i kullan›labilir.<br />
Pik fliddeti = K k C 4.9<br />
LÜM‹NESANS ANAL‹Z S‹STEMLER‹<br />
Fotolüminesans ölçümü için kullan›lan cihaz bileflenleri temelde absorpsiyon spektroskopisinde<br />
kullan›lanlarla benzer yap›dad›r. Ancak; cihaz bileflenlerinin yerleflimi<br />
bak›m›ndan absorpsiyon sistemlerinden ayr›l›rlar. Ifl›k kayna¤›ndan gelen ›fl›man›n<br />
dedektör üzerine düflmesini önlemek için dedektör ›fl›k yoluna 90°’lik bir<br />
aç› ile yerlefltirilir. Bundaki amaç; dedektöre sadece numune çözeltisindeki moleküller<br />
taraf›ndan yay›lan floresans <strong>ve</strong>ya fosforesans ›fl›mas›n›n ulaflmas›n› sa¤lamak,<br />
uyaran ›fl›¤›n dedektöre ulaflmas›n› önlemektir.<br />
S›v› faz›nda floresans ölçümü için kullan›lan cihazlar filtreli florimetre <strong>ve</strong> spektroflorimetre<br />
olmak üzere iki tiptir. Spektroflorimetreler ise tek ›fl›k yollu <strong>ve</strong> çift ›fl›k<br />
yollu olmak üzere kendi içinde ikiye ayr›labilir. Filtreli florimetrelerde <strong>ve</strong> tek ›fl›k<br />
yollu spektroflorimetrelerde analize bafllamadan önce cihaz›n floresans fliddetinin<br />
ayarlanmas› için kinin sülfat <strong>ve</strong>ya rodamin B gibi bir standard›n floresans ölçümünün<br />
yap›lmas›na gerek vard›r. Çift ›fl›k yollu spektroflorimetrelerde ise bu tarz bir<br />
analizin yap›lmas›na gerek yoktur. Bu cihazlarda yer alan <strong>ve</strong> rodamin B içeren bir<br />
hücrenin floresans› sistemde referans olarak kullan›l›r.<br />
Floresans ölçümü için kullan›lan bir cihaz›n temel bileflenleri fiekil 4.7’de<br />
görülmektedir.<br />
Ifl›n<br />
Kayna¤›<br />
Uyarma band›<br />
seçimi için filtre<br />
<strong>ve</strong>ya<br />
monokromatör<br />
Sinyal ifllemcisi<br />
4. Ünite - Lüminesans <strong>Spektroskopisi</strong><br />
Numune<br />
kab›<br />
Floresans band›<br />
ay›r›m› için filtre <strong>ve</strong>ya<br />
monokromatör<br />
Dedektör<br />
fiimdi s›ras›yla bu bileflenleri daha detayl› inceleyelim.<br />
• Ifl›n kaynaklar›: Filtreli florimetrelerde ›fl›n kayna¤› olarak düflük bas›nçl›<br />
civa lambas› kullan›l›rken spektroflorimetrelerde ise ksenon ark lambas›<br />
kullan›l›r. Düflük bas›nçl› civa lambas› kullan›ld›¤›nda civan›n emisyon hatlar›<br />
olan dalga boylar›nda (254, 312, 365, 405, 436, 546, 577, 691 <strong>ve</strong> 773 nm)<br />
bir ›fl›ma, ksenon ark lambas› kullan›ld›¤›nda ise 250 ile 600 nm aral›¤›nda<br />
sürekli bir ›fl›ma elde edilebilir.<br />
• Dalga boyu ay›r›c›lar: Filtreli florimetrelerde <strong>ve</strong> spektroflorimetrelerde<br />
uyarma <strong>ve</strong> fotolüminesans dalga boylar›n›n ayr›lmas› için her bir sistemde iki<br />
adet dalga boyu ay›r›c›ya gerek vard›r. Filtreli florimetrelerde giriflim <strong>ve</strong>ya absorpsiyon<br />
filtrelerinden birisi kullan›l›rken, spektroflorimetrelerde daha geliflmifl<br />
sistemler olan monokromatörler kullan›l›r. Monokromatörler sayesinde<br />
spektroflorimetrelerde uyarma <strong>ve</strong> fotolüminesans dalga boylar› belirli bir<br />
fiekil 4.7<br />
93<br />
Bir florimetre <strong>ve</strong>ya<br />
spektroflorimetrenin<br />
temel bileflenlerinin<br />
flematik olarak<br />
görünümü
Change language