Скачать - Института иммунологии и физиологии УрО РАН

Other articlesу данного вида крапивницы отсутствуют, ее диагностика,на сегодняшний день, основывается на двухэтапном алгоритме[4]. Данный алгоритм включает в себя проведениепробы с аутосывороткой и тест высвобождения гистаминаиз базофилов здоровых доноров под действием кровибольных. Признанным «золотым стандартом» принятосчитать базофильный тест, но его постановка возможнатолько всего в нескольких научно-исследовательскихцентрах мира. К рутинному использованию доступентолько тест с аутосывороткой, в основе которого лежитобнаружение аутоантител к Ig E и к высокоаффинномуIgE- рецептору. При внутрикожном введении аутологичнойсыворотки больным хронической крапивницей, данныеаутоантитела активируют тучные клетки кожи, в результатечего образуется волдырь и гиперемия в местеинъекции.№01(93) january 2012 COLLECTION OF ARTICLESПроба с аутосывороткойВпервые волдырно-гиперемическая реакция на введениевнутрикожно аутосыворотки была описана в 1986гGrattan и др [36], который предположил наличие в кровигистамин – либерирующего факторы у некоторых больныхс хронической крапивницей. Реакция оцениваласьв течение 2 часов, в результате формировался волдырьразмером не менее 5мм и гиперемия не менее 10мм. В1993 году Hide с соавторами [49] также сообщил о внутрикожномвведении сыворотки и полученной гиперреактивностикожи у некоторых больных с хроническойкрапивницей и назвал данный метод «autologous serumskin test» (ASST). Позднее Sabroe (1999) и др. [79] предложилисвою стандартизированную методику, котораяобеспечивает оптимальную чувствительность и специфичностьдля выявления аутоантител у больных с хроническойкрапивницей. Оценку результатов осуществляличерез 30 и 60 минут. Площадь гиперемии и волдырярассчитывали по формуле: S= π(d1+d2)/4)2, где d1 иd2 – это два перпендикулярных диаметра. Положительнойсчитали реакцию при наличии гиперемии и волдыряплощадью не менее 9мм2. Toubi [87] результат оцениваетпо градуированной шкале от 0 до 3 при измеренииволдыря и гиперемии через 30 и 60 мин. Учет идеттаким образом: 0 – негативный контроль; 1- волдырь на1.5мм>негативного контроля, гиперемия 15мм; 2 – волдырьна 3-5мм> негативного контроля, гиперемия>15мм;3 – волдырь на 6-10мм>негативного контроля. Hide предлагаетсчитать пробу положительной, если она превышаеттест-контроль на 1,5мм.В России положительная кожная проба с аутосывороткойрегистрируется у 41% - 59,6% больных с хроническойкрапивницей [11,4]. На сегодняшний день проба саутосывороткой является скрининговым методом диагностикихронической аутоиммунной крапивницы [79]. Темне менее, нельзя не отметить, что имеются сообщения одостаточно низкой чувствительности и специфичностиданного метода и ставится под сомнение возможностьего использования для диагностики ХАК [45,42,89,24].В подтверждение неспецифичности данного теста авторыссылаются на тот факт, что тест может быть положительныму пациентов с бронхиальной астмой, поллинозоми здоровых добровольцев, а также у больных с аутоиммуннымтиреоидитом после регресса уртикарных высыпаний[45,89,58].Таким образом, вопрос о диагностической значимостипробы с аутосыворотки остается открытым и постоянноведется поиск новых способов оценки положительногорезультата данной пробы.Тест высвобождения гистамина избазофилов здоровых доноров поддействием сыворотки крови больныхи другие лабораторные методы длядиагностики аутоиммунной крапивницыТест гистаминолиберации базофилов развиваетсяи совершенствуется на протяжении последних 20 лети в настоящий момент считается эталоном в диагностикеХАК [39,71]. Лейкоцитарную суспензию готовят отдвух неатопических доноров, чьи базофилы предварительнопоказывали выход гистамина не более 30% от общегосодержания после стимуляции их оптимальной дозойанти-IgE-антител [26]. Для проведения анализа сывороткукрови пациентов смешивают с базофилами доноров,в результате происходит взаимодействие аутоантителприсутствующих в сыворотке пациентов с донорскимиклетками, что приводит к их активации, дегрануляциии выходу гистамина. Количество вышедшего гистаминаопределяют затем с помощью иммуноферментного анализаили методом флуометрии [56,38]. Результат выражаетсяв процентах и рассчитывается по формуле: HR = (A– B)/Tх100, где HR – выход гистамина, А – индуцированныйвыход гистамина, В – базальный выход гистамина,Т – общая концентрация гистамина. По результатам проведенныхисследований, было установлено, что сывороткипациентов с аутоиммунной крапивницей имеют болеевысокий уровень выхода гистамина (23%) по сравнениюс сыворотками здоровых доноров (12%) [17]. Тем не менее,данный метод является довольно трудоемким и длительнымдля его использования в рутинной практике. Сцелью определения содержания в сыворотке крови самихантител к FcεRIα рецептору и молекуле IgE в лабораторныхусловиях разработаны методы полуколичественногоиммуноблоттинга (Вестерн-блоттинг) и иммунноферментногоанализа [33]. ИФА был разработан для определенияантител к FcεRIα рецептору еще в 1995 году. Тогдана него возлагали большие надежды в плане повышениявозможностей диагностики ХАК, но позднее выяснилось,что он обладает низкой специфичностью [38]. Методиммуноблоттинга также не оправдал ожиданий, таккак дает большое количество ложно-положительных результатовза счет присутствия нефункциональных аутоантители не может быть использован в качестве скрининговогометода для диагностики ХАК [72].Относительно недавно для диагностики аутоиммуннойкрапивницы стали использовать метод проточной цитометриис целью определения регуляторных маркеровдля базофилов, таких как CD63 и CD203c [17,39,23]. Поданным одних авторов определение CD63 является на-107