Aus der Arbeitsgruppe Immunologie der Tierärztlichen Hochschule ...

Pipes A (1-fach konzentriert):
26
NaCl 110 mmol/l
KCl 5 mmol/l
Pipes 25 mmol/l
NaOH 40 mmol/l
Der Pipes A Puffer wurde als 10-fach Konzentrat angesetzt, in aliquoten Teilen bei –20°C
gelagert und bei Bedarf 1:10 mit Aqua dest. verdünnt.
Für die Freisetzungsreaktion wurde dem Puffer Ca 2+ und Mg 2+ zugesetzt, da die Blutzellen
vor der Freisetzung in Ca 2+ /Mg 2+ freiem PBS vorliegen und diese Ionen für die
Histaminfreisetzung benötigt werden (MAASCH et al., 1984; MAGRO et al., 1987). Für die
Freisetzung sollen die Zellen eine Endkonzentration von 1 mmol/l Ca 2+ und 1 mmol/l Mg 2+
zur Verfügung haben. Der Puffer wurde jeweils nur in der Menge angesetzt, die in ca. 4
Wochen zu verbrauchen ist und solange bei 4°C gelagert.
Pipes B:
Pipes A mit 2 mmol/l CaCl2 und 2 mmol/l MgCl2, pH 7,4
3.2.3 Antikörper und Nachweisreagenzien
3.2.3.1 Antikörper für den RIA
a) Ziege anti Histamin Serum
Zum Nachweis von N-Acyl-Histamin diente ein Ziege anti N-Acyl-Histamin Serum (kurz
Ziege His), das von der Firma LDN als Reinserum zur Verfügung gestellt wurde.
Eingesetzt wurde es in einer Verdünnung 1:10000.