Fußnoten und weiteren Quellen - Projektwerkstatt

6786-01-168 - Universität Gießen
BBA, 20. Mäz 2006
Glucanase ((7r3- 7r4) -ß- GluanaseGen)
Die transgene Glucanase-Linie pJH271-Beta-Glu-307 enthält das Codon-optimierte (1,3'1,4Iß-Gluanase
Gen, das durch intragenische Rekombination von Glucanasen aus Bacillus amyloliquefaciens und
8. maerans ezeugt wurde. Das (1,3-1,4)-ß-GlucanaseGen steht unter Kontrolle des Endospermspezifischen
Promotors und Signalpeptids des Hordein-Gens Hor 3-1 aus Gerste, wodurch die Expression
des Transgens zeitlich und räumlich auf das keimende Gerstenkorn beschränK bleibt. Das durch dieses
Gen codierte Enzym Glucanase katalysiert den Abbau von Glucanen, wodurch sich die Nutzung dieser
Kohlenhydrate im keimenden Korn in der transgenen Linie gegenüber der Ausgangslinie verbessern soll.
Glufosinat- Resistenz (äanGen)
In beiden transgenen Linien steht das bar-Gen unter Kontrolle des Promotors des Ubiquitin-Gens Ubi-l aus
Mais, wodurch das Gen konstitutiv exprimieft wird. Das in den transgenen Pflanzen ausgeprägte Enzym
Phosphinothricin-Acetyltransferase (PAT) hat dieselbe Aminosäuresequenz wie das im BaKerium
Streptomyces hygroscopicus natürlich vorkommende PAT-Enzym. Dieses Enzym besiEt eine sehr hohe
Substratspezifität für den Herbizidwirkstoff Glufosinat (Phosphinothricin). Eine UmseEung pflanzlicher
StoffinrechselproduKe ist nicht bekannt; selbst das StruKur-Analogon Glubminsäure wird nur sehr schwach
umgeseEt. Transgene Pflanzen, die das bar-Gen enthalten, sind phänotypisch unauffällig, so dass von
einer Störung des pflanzlichen Stoffuvechsels aufgrund einer eventuellen Acetylierung anderer Substrate
nicht auszugehen ist. Solche Pflanzen sind in vielen Freisetzungen getestet worden. Toxische, allergene
oder negative ökologische Auswirkungen sind nicht aufgetreten. Im Falle eines Vezehrs von Teilen
transgener Pflanzen würde das PAT-Enzym als Protein im menschlichen und tierischen VerdauungstraK
abgebaut.
Eine Applikation des Komplementäirherbizids ist im Rahmen des Freisetzungsversuchs nicht vorgesehen.
Markergen (sdFFGen)
Das Codon-optimierte sGFPGen stammt ursprünglich aus der Qualle Aquorea victoria. Es steht unter
Kontrolle des konstitutiven 35S-Promotors und codiert für ein green fluoracent protein. Die Expression des
s6FfGens ist unter UV-Licht nachweisbar. Hinweise auf eine Beeinträchtigung des Stoffiruechsels in Pflanze
oder Tier sowie auf Gesundheitsrisiken im Falle eines Vezehrs von Teilen transgener Pflanzen liegen nicht
vor.
Weiterc Gene
Als weiteres potentiell in die transgenen Pflanzen transferiertes Gen kommt aphA(3/il (npü14 in Frage,
das unter der Kontrolle eines prokaryontischen Promotors steht, so dass es in den Pflanzen nicht exprimieft
würde. Es bewirkt daher keine Veränderung des pflanzlichen Stoffiruechsels. Dieses Gen liegt außerhalb der
T-DNA und seine Übertragung auf das fflanzengenom ist daher theoretisch nur selten zu erwarten; Untersuchungen
mit ähnlichen KonstruKen in anderen Fällen haben jedoch gezeigt, dass solche Transferereignisse
häufiger als durch den bekannten Mechanismus prognostiziert passieren. Durch Southern blot-
Anafyse wurde jedoch gezeigt dass das npüII-Gen nicht im Genom der transgenen Gerstenlinien enthalten
ist.
Bei der gentechnischen Transformation von Pflanzen wird die eingeführte Fremd-DNA an zufälligen
Positionen im Pflanzengenom inseriert. Dadurch kann es theoretisch zu einer Beeinflussung benachbarter
Pflanzengene und zu Veränderungen des Stoffrruechsels kommen. Solche Veränderungen können auch bei
der konventionellen Züchtung durch genetische Rekombinationen in der Meiose und bei Gewebekulturen
durch somaklonale Variation auftreten. Nach Angaben der Antragstellerin ist der Phänotyp der transgenen
Gerstenlinien im Gewächshaus unauffällig; es gibt keine Hinweise auf eine Störung'des pflanziichen
Stoffiruechsels. Bei FreiseEungsversuchen in den USA wurden keine morphologischän Veränderungen
beobachtet.
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