Capsaicinoide in frischem und verarbeitetem Gewürzpaprika

ARBEITSVORSCHRIFTEN Seite 123
Herstellung der Standardlösung I:
5 ml der Stammlösung werden auf 250 ml verdünnt.
Herstellung einer Verdünnungsreihe:
Aus der Standardlösung I werden geeignete Verdünnungen hergestellt und zur Kalibrierung
verwendet. Das nachfolgende Pipettierschema zeigt die in der Regel verwendeten
Verdünnungsschritte, von denen meistens 20 µl injiziert wurden. Der lineare Kalibrierbereich
sollte mindestens 5 Verdünnungsstufen umfassen.
Verdünnung Konz. µg/ml Konz. pmol/20 µl
20 ml 1,75 119,3
25 ml 1,40 95,4
5 ml Standard- 50 ml 0,70 47,7
lösung I auf 100 ml 0,35 23,9
250 ml 0,14 9,5
Die Konzentrationen der Standardlösungen können entsprechend der Empfindlichkeit des
verwendeten Fluoreszenzdetektors anders gewählt werden. Meistens wurden während der
Chromatographie einer Untersuchungsreihe abwechselnd je 1-2 Standardlösungen und
nachfolgend 2-3 Probelösungen injiziert.
14.4.3.2 Berechnung des Capsaicinoidgehaltes
Die Quantifizierung von Capsaicin, Dihydrocapsaicin und Nordihydrocapsaicin und ggf. der
Minorcapsaicinoide erfolgt über die nach 14.4.3.1 aufgenommene Kalibriergerade. Die
Konzentration an Capsaicin, Dihydrocapsaicin und Nordihydrocapsaicin wird zunächst als
Konzentration PSVA ausgedrückt. Da sich bei allen Capsaicinoiden aufgrund des identischen
fluoreszierenden Vanillylrestes dieselbe molare Fluoreszenzausbeute ergibt, kann unter
Berücksichtigung der Molmassen durch Umrechnungsfaktoren die Konzentration der
einzelnen Capsaicinoide berechnet werden.
Als molare Massen werden hierbei folgende Werte zu Grunde gelegt:
Capsaicin 305,4 g/mol, Dihydrocapsaicin 307,4 g/mol, Nordihydrocapsaicin 293,4 g/mol,
Decansäurevanillylamid 307,4 g/mol, Homocapsaicin 319,4 g/mol,
Homodihydrocapsaicin 321,4 g/mol