Capsaicinoide in frischem und verarbeitetem Gewürzpaprika

EXPERIMENTELLER TEIL Seite 48
9 Probenvorbereitung
9.1 Methoden für die HPLC
9.1.1 Pulver
9.1.1.1 Vereinfachte Aufarbeitung (nur Extraktion)
Für die Bestimmung des Gesamtcapsaicinoidgehaltes von Paprikapulvern mittlerer Schärfe
(ab ca. 8 mg/kg Gesamtcapsaicinoidgehalt) wurde nach einer einfachen, effektiven und
gleichzeitig schnellen Probenaufarbeitung gesucht.
Bei Pulvern diesen Schärfegrades sollte eine alleinige Extraktion mit einem geeigneten
Lösungsmittel ohne weitere aufwendige Aufreinigungsschritte wie z.B. die flüssig-flüssig-
Verteilung (Methode nach Peusch 90 ) ausreichend sein. Der Anteil der Capsaicinoide
verglichen mit unerwünschten Begleitstoffen sollte so groß sein, daß sich die Capsaicinoide
deutlich von Matrixpeaks abzeichnen.
Um Probleme im chromatographischen System zu vermeiden, sollte die Elutionsstärke der
Probelösungen der des Eluenten entsprechen (MeCN + H2O + HAc; 50+50+0,5; v+v+v).
Sinnvoll ist deshalb die Extraktion mit einer Acetonitril-Wasser-Mischung (1+1; v+v) bzw.
Methanol-Wasser-Mischung (7+3;v+v).
Die Capsaicinoide sind aufgrund ihres phenolischen wie auch unpolaren Acyl-Restes in
relativ vielen Lösungsmitteln unterschiedlicher Polarität, wie z. B. Methanol, Benzol, Aceton,
gut löslich. Schlecht löslich sind sie in heißem und praktisch unlöslich in kaltem Wasser. Bei
Extraktion mit den o. g. Mischungen mußte daher wegen des relativ hohen Wasseranteils mit
einer unvollständigen Extraktion der Capsaicinoide gerechnet werden. Aus diesem Grund
wurden verschiedene Mischungen mit unterschiedlich hohen Anteilen des jeweiligen
organischen Lösungsmittels zur Untersuchung eines ausgewählten Pulvers eingesetzt
(Tab. 12).
Um die Eignung zur Capsaicinoidextraktion festzustellen, wurde das Pulver mit MeOH,
MeCN oder den Gemischen mit Wasser extrahiert. Zur Feststellung der Reproduzierbarkeit
wurden jeweils zwei Extraktionen durchgeführt. Dazu wurden 4 g Pulver mit 40 ml
Lösungsmittel für 2 Stunden unter Rückfluß extrahiert. Nach dem Abkühlen wurde in einen
50 ml Meßkolben dekantiert. Der Extraktionsrückstand wurde mit 5 ml des jeweiligen
Lösungsmittels nachgewaschen und durch einen vorher mit dem Lösungsmittel befeuchteten
Faltenfilter filtriert. Anschließend wurde mit dem Lösungsmittel bis zur Marke aufgefüllt.