Capsaicinoide in frischem und verarbeitetem Gewürzpaprika

EXPERIMENTELLER TEIL Seite 29
Experimenteller Teil
8 Meßmethoden
8.1 Hochleistungsflüssigchromatographie
Die von Peusch 90 entwickelte reversed-phase HPLC-Methode mit Fluoreszenzdetektion sollte
an eine elektrochemische Detektion angepaßt werden.
Bestimmt wurden bei Peusch die drei Capsaicinoide Capsaicin (C), Dihydrocapsaicin (DC)
und Nordihydrocapsaicin (NDC). Die Trennung erfolgte auf einer reversed-phase Trennsäule
(LiChrospher®RP-18 e, 5 µm, 250 x 4 mm) bei Raumtemperatur mit einem angesäuerten
Acetonitril/Wasser-Eluenten (MeCN+H2O+Eisessig; 50+50+0,5; v+v+v).
Zu beachten ist, daß bei den so gewählten Bedingungen keine Trennung von
Pelargonsäurevanillylamid (PSVA) von Capsaicin möglich ist. Das Signal von C setzt sich
also immer aus C und PSVA zusammen und wird deshalb im folgenden, wenn nicht
besonders erwähnt, nur als C bezeichnet. PSVA spielt aufgrund seines geringen Anteils, der in
der Literatur mit Konzentrationen zwischen 1,5 - 4,6 % beschrieben wird 79 , nur eine
untergeordnete Rolle beim Gesamtcapsaicinoidgehalt. Detektiert wurde mit einem
Fluoreszenzdetektor bei λEx= 280 nm und λEm= 320 nm.
Die Quantifizierung erfolgte durch externe Eichung an PSVA. 90
NDC
C/PSVA
DC
0 5 10 15 20 25 30
Zeit (min)
HomoC
DSVA
Homo
DC I
Homo
DC II
Abb. 9: Chromatogramm eines Paprikaextraktes aus frischen Früchten (RP-18 e, 5 µm, 250 x
4 mm ID, mobile Phase: MeCN+H2O+Eisessig (50+50+0,5; v+v+v), Flußrate 1 ml/min