Comunicazioni orali e Poster sul Monitoraggio biologico - Giornale ...

COMUNICAZIONI ORALI E POSTER SUL MONITORAGGIO BIOLOGICO G Ital Med Lav Erg 2004; 26:4, Suppl
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rio, ma vi sono evidenze sperimentali che il sudore o lo strato corneo
possano essere utilizzati per monitorare l’esposizione professionale
ad alcuni tossici, ed in particolare ai metalli: Omokhodion
(7, 8) e Lilley (9) hanno riportato che le concentrazioni di Pb nel
sudore sono proporzionali a quelle ematiche e Stauber nel 1988
(10) ha studiato la presenza di rame, piombo, cadmio e zinco nel
sudore e nel sangue. È noto inoltre che lo strato corneo ha una funzione
di “riserva” sia per i metalli assorbiti (11) e per quelli escreti.
Tale rilievo apre interessanti prospettive di ricerca e di applicazione
pratica per la facilità con cui è possibile rimuovere parte dello
strato corneo (stripping con cerotto) e raccogliere sudore per
monitorare la concentrazione di un tossico.
Scopo del nostro lavoro è stato quello di studiare con il metodo
in vitro delle Franz cell (12) l’escrezione di un metallo (cobalto)
attraverso la cute con l’obiettivo di dimostrare che la cute
svolge un ruolo di barriera permeabile bidirezionale.
Materiali e metodi
Gli esperimenti sono stati condotti utilizzando celle di Franz in
vetro e lembi di cute proveniente da scarti di chirurgia plastica (12).
La cute è stata pretrattata con rimozione dello strato corneo con la
metodica dello stripping (11) ed è stata montata rovesciata sulle celle
di Franz (14 celle) in modo che il lato dermico sia esposto alla soluzione
donatrice. Come soluzione ricevente è stato utilizzato sudore
sintetico (13). Una soluzione di Co in soluzione fisiologica (150
ppb) è stata applicata (2 mL) su ogni cella e 2mL di soluzione ricevente
è stata rimossa a 2-4-8-6-8-20-22-24 ore. La concentrazione
del Co nella soluzione ricevente è stata valutata con tecnica analitica
total-quant in ICP-MS (inductively coupled plasma mass spectrometry),
utilizzando il metodo di calibrazione esterna (14). Per la taratura
dello strumento viene utilizzata una soluzione contenente Co
(Perkin Elmer Calibration Standard 3 10 µg/ml) alla concentrazione
di 10 µg/L. Accuratezza e precisione sono correlate a parametri strumentali
quali bontà della calibrazione e calibrazione del rivelatore,
nel caso di concentrazioni elevate. Èstato utilizzato per l’analisi dei
campioni materiale certificato Nist 1640 (trace elements in water).
La precisione espressa come coefficiente di variazione (CV) varia
del 4-8% intra-serie e del 6-12% inter-serie. Il limite di rilevabilità è
di 0,003 µg/L. I risultati ottenuti sono stati corretti in foglio elettronico
Excell per compensare l’effetto della diluizione.
Risultati
Il flusso di escrezione del Cobalto è riportato nella figura 1 ed è
stato calcolato di 0,0166 ± 0,02 µg/cm 2 /ora. In particolare, è possibile
notare un incremento progressivo del passaggio del metallo con
una curva rettilinea che aumenta la sua pendenza dalle 16 ore in poi.
Le curve ottenute dai 14 esperimenti risultano riproducibili e le deviazioni
standard (riportate nel grafico di Figura 1) sono contenute.
Figura 1. Flusso di escrezione del Co (µg/cm 2 ) in funzione
del tempo
Discussione
Gli esperimenti da noi condotti hanno dimostrato per la prima
volta che in una condizione standard in vitro è possibile un passaggio
percutaneo con diffusione passiva dall’interno della cute
verso l’esterno. Ciò conferma la possibilità di utilizzare la via cutanea
come matrice per il monitoraggio biologico e il ruolo della
cute come barriera semipermeabile bidirezionale con flusso di assorbimento
e di escrezione che può avvenire in modo passivo nelle
condizioni in vitro e anche attivo nelle condizioni in vivo. Il sistema
in vitro ha confermato quanto è stato osservato nei professionalmente
esposti, nei quali la concentrazione di alcuni metalli
nel sudore è proporzionale a quella presente nel siero: un esempio
caratteristico è quello del Pb le cui concentrazioni sono simili nel
siero e nel sudore (10) e nelle urine e nel sudore (15). Per il Ni e
il Cd sono stati invece riscontrati livelli più elevati nel sudore rispetto
alle urine (15), in questo caso si deve ipotizzare la presenza
anche di un sistema attivo di escrezione attraverso questa via.
Per il Cu invece la concentrazione rilevata nel sudore risulta più
bassa che nel siero, e questo può essere spiegato con il forte legame
di questo metallo con le proteine plasmatiche (10).
Il flusso di escrezione da noi rilevato per il Co risulta pressoché
sovrapponibile a quello ottenuto da studi di assorbimento in
vitro: in particolare Larese (4) riporta un flusso di Co attraverso
la cute intera di 0,0123 ± 0,0054 µg/cm 2 /ora, valori che risultano
sovrapponibili a quelli ottenuti per l’escrezione. Tale dato, insieme
ai rilievi su lavori esposti, conferma ulteriormente il ruolo
della cute come sistema di assorbimento/escrezione ed è una pietra
miliare per l’approfondimento di questa matrice per il monitoraggio
biologico nei professionalmente esposti.
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