Comunicazioni orali e Poster sul Monitoraggio biologico - Giornale ...

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G Ital Med Lav Erg 2004; 26:4, Suppl COMUNICAZIONI ORALI E POSTER SUL MONITORAGGIO BIOLOGICO www.gimle.fsm.it 91 mercapturico (AMMA) che in precedenza non era mai stato identificato neppure nell’animale (1). Tale metabolita è presente nelle urine di soggetti esposti a DMA in quantità rilevanti (dell’ordine di varie decine di mg/l). Scopo del presente lavoro è quello di riportare i primi dati disponibili sull’AMMA nel monitoraggio biologico delle esposizioni professionali a DMA e confrontarli con quelli della N-metilacetammide (NMA) per la quale è disponibile da anni un valore valore limite biologico. Le concentrazioni della DMA nell’ambiente di lavoro controllato erano così basse da essere difficilmente quantificabili; durante la fase preparatoria dello studio ci si era peraltro resi conto che una certa quota di DMA veniva assorbita dai lavoratori per via percutanea. Materiali e metodi Un gruppo di lavoratori di un’azienda che produce fibre sintetiche di tipo acrilico ha collaborato per valutare l’intensità dell‘esposizione personale a DMA attraverso il monitoraggio biologico. Con questa logica ciascuno di loro ha raccolto una serie di campioni di urina secondo il seguente schema: a) all’inizio e alla fine di un turno di lavoro dopo 2 giorni di riposo, b) all’inizio e alla fine del turno di lavoro del giorno seguente, e c) prima dell’inizio del terzo giorno di lavoro. Tenendo presente che la DMA aderita sulla cute poteva essere assorbita anche dopo il termine del turno di lavoro, i dipendenti che hanno partecipato allo studio si sono sottoposti a doccia e a cambio di tutti gli indumenti al termine di ogni turno di lavoro. I campioni di urina sono stati raccolti in flaconi di vetro e posti a - 20° C fino all’analisi. La quantificazione della NMA è avvenuta con metodica gascromatografica con rivelatore di massa. Dopo purificazione dei singoli campioni di urina con colonnine SPE C18, l’AMMA è stato analizzato utilizzando un micro- HPLC con trappola ionica e spettrometria di massa. Le concentrazioni di AMMA e NMA sono state rapportate alle concentrazioni urinarie della creatinina. Risultati e Discussione Nella figura 1 sono riportati i valori medi (in mg/g creat) delle concentrazioni di NMA e di AMMA nei campioni di urina raccolti all’inizio e alla fine del turno di lavoro nei vari giorni considerati. Come si nota, all’inizio del turno di lavoro dopo 2 giorni di riposo, le concentrazioni di NMA e di AMMA presentavano valori più bassi di quanto rilevato in fasi successive. Le concentrazioni di NMA tendevano ad aumentare considerevolmente durante il lavoro, per tornare a livelli piuttosto modesti prima dell’inizio di un nuovo turno di lavoro. L’AMMA ha presentato un comportamento molto differente rispetto quello della NMA. All’inizio del turno di lavoro dopo 2 giorni di riposo era a livelli medi di 7,5 mg/g creat. che aumentavano a 9,3 mg/g creat. al termine del turno di lavoro. Tale incremento continuava anche nei Figura 1. Concentrazioni medie di NMA (colonne grigie) e di AMMA (colonne chiare) nelle urine raccolte all’inizio (I.T.) e alla fine di un turno di lavoro (F.T.) dopo 2 giorni di riposo, e nei due successivi giorni di lavoro giorni successivi con valori di 20,1, 14,9 e 19,3 mg/g/creat. rispettivamente all’inizio e alla fine del 2° giorno di lavoro e all’inizio del 3° giorno. È evidente che la cinetica biologica dei 2 metaboliti è considerevolmente diversa. L’emivita urinaria della NMA calcolata con i valori medi delle concentrazioni di NMA nei campioni raccolti al termine del 2° giorno di lavoro rispetto a quelle rilevate all’inizio del 3° giorno di lavoro è risultata pari a 8,6 ore. Lo stesso calcolo non è stato possibile per l’AMMA le cui concentrazioni urinarie hanno continuato ad aumentare durante i 3 giorni di raccolta dei campioni. In modo approssimativo, utilizzando i dati delle concentrazioni del 3° giorno di lavoro e quelli dell’inizio del turno di lavoro dopo 2 giorni di riposo si ottiene una emivita di circa 35 ore. L’emivita biologica della NMA, che come abbiamo segnalato è piuttosto rapida, trova conferme dai dati sperimentali di Nomiyama e coll. (2000). Tali autori hanno organizzato un’esposizione controllata a DMA di alcuni soggetti con la raccolta di campioni di urine ogni 3-6 ore. Tale studio ha permesso di calcolare in modo accurato l’emivita urinaria della NMA che è risultata pari a 5,6 ore. Per quanto riguarda l’AMMA non vi sono dati della letteratura che rappresentino un supporto ai nostri calcoli, ma non vi è dubbio che tale metabolita venga sintetizzato ed escreto in modo più lento della NMA come risulta ben evidente dalla Figura 1. È possibile pertanto che questi mercapturati permettano di valutare esposizioni di più giorni consecutivi; ulteriori studi sono comunque necessari per confermare queste ipotesi. Bibliografia 1) Perbellini L, Princivalle A, Caivano M, Montanari R. Biological monitoring of occupational exposure to N,N-dimethylacetamide with identification of a new metabolite. Occup Environ Med 2003; 60: 746-751. 2) Nomiyama T,Omae K, Ishizuka C, Yamauchi T, Kawasumi Y, Yamada K, Endoh H, Sakurai H. Dermal absorption of N,N-dimethylacetamide in human volunteers. Int Arch Occup Envir Health 2000; 73: 121-126.
COMUNICAZIONI ORALI E POSTER SUL MONITORAGGIO BIOLOGICO G Ital Med Lav Erg 2004; 26:4, Suppl 92 www.gimle.fsm.it P. Piccoli 1 , F. Foresto 2 , M. Carrieri 2 , L. Padovano 1 , M. Di Mare 1 , G.B. Bartolucci 2 , M. Manno 1 Fenotipizzazione del CYP 2E1 in vivo come biomarker di esposizione, effetto e suscettibilità a xenobiotici: una nuova metodica 1 Dipartimento di Scienze Mediche Preventive, Sezione di Medicina del Lavoro, Università degli Studi di Napoli Federico II, Napoli 2 Dipartimento di Medicina Ambientale e Sanità Pubblica, Università degli Studi di Padova, Padova RIASSUNTO. Scopo del nostro lavoro è stato la modifica di un metodo per la quantificazione del clorzoxazone(CHZ) e del suo principale metabolita 6-idrossiclorzoxazone (6-OH-CHZ) nel siero come indicatore biologico di esposizione, effetti o suscettibilità a xenobiotici. I due analiti e la fenacetina, utilizzata come standard interno, sono stati estratti mediante il ter-butl metil etere. Il campione è stato quindi analizzato in HPLC/UV su una colonna C18 ODS 5 µm con una fase mobile costituita da acetonitrile e acido acetico 0.5% (30:70 v/v, rispettivamente) a lunghezza d’onda 287 nm. Le rette di calibrazione presentano un coefficiente di correlazione altamente significativo, pari a 0.9994 nell’intervallo di concentrazione 0.05-5 µg/mL per il 6-OH-CHZ e di 0.9996 nell’intervallo 0.25-5 µg/mL per il CHZ. I coefficienti di variazione interday e intraday sono rispettivamente
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