Tanenlerin fotometrin miktar tayini - Ankara Üniversitesi Kitaplar ...

kurutulur ve tekrar 500 ml'lik yuvarlak cam balona aktanlır, üzerine 250
ml'lik İN H2SO4 ilave edip 1 saat geri çevirici soğutucuda ısıtılır. Hidroiizat
soğuduktan sonra 500 ml'lik ayırma hunisine aktanlır ve 6 defa 50'şer
ml kloroformla ekstre edilir. San renkli kloroform ekstresi 500 ml lik erlenmayerde
toplanır ve 10 g susuz sodyum sülfatla kurutulur. Kloroform
ekstresi cam pamuğundan 100 ml'lik yuvarlak cam balona süzülür ve
rotavaporda 3 ml kalıncaya kadar uçurulur (İ.T.K. 2) ve sütuna tatbik
edilir.
Sütun kromatografisi:
Cam sütun: 80 cm, 0 = 2 cm
Stasyoner faz: Kieselgel SC (0.063 - 0.2 mm merck) 100 g.
Solvan: Diklormetan+metanol (95+5) 100 ml
Akış hızı: 2 damla/saniye
(90+10) 400 ml
Fraksiyonlar: 15 ml
18 p-Glisiretik asit içeren fraksiyonlar birleştirilir ve rotavaporda uçurulur.
5 ml etanol ve bir spatül ucu aktif kömür ilave edip hafifçe kaynatılır ve
süzülür. Elde edilen berrak çözeltiye 3-5 ml hekzan ilave edilir ve +4°C
de 18 p-glisiretik asit kristallendirilir.
İ.T.K için aşağıdaki şartlar uygulanır.
Metod: Yükselen (15 cm)
Tabaka: Kieselgel 6OF254
Çözücü sistemi: Etilasetat+Etanol+su+konst. amonyak çözeltisi
(65+25+9+1)
93