Tanenlerin fotometrin miktar tayini - Ankara Üniversitesi Kitaplar ...

ve 20 dakika süreyle kanştınlır. S üzüntünün 25 ml si rotavaporda su
balyosunda 50°C nin altındaki sıcaklıkta kuruyuncaya kadar uçurulur.
Bakiye 5 ml metanolle alınır. Bu çözeltinin 50 si band şeklinde plağa
tatbik edilir.
Mukayese çözeltisi: 5 mg fenazon 1 ml metanolde çözülür, bunun 10 »t I
si band şeklinde plağa tatbik edilir.
İ.T.K aşağıdaki koşullarda uygulanır:
Metod: Yükselen (15 cm)
Tabaka: Kieselgel 6OF254
Çözücü sistemi: Aseton+kloroform+su (70+30+2)
Belirteç: Sohran uçurulduktan sonra
1. UV 254 nm'de floresansı azaltan lekeler işaretlenir.
2. % 0,2 lik Echtrotsalz B reaktifinin sulu çözeltisi püskürtülür. 10 dakika
sonra gün ışığında bakılır, ardından amonyak buhanna tutulur.
Değerlendirme: Kromatogramın UV 254 nm de incelenmesinde
mukayese çözeltisinin tatbik edildiği kısımda Rf 0,25 - 0,30 civannda
flor esansın şiddetini kuvvetle azaltan leke görülür. Analiz çözeltisinin tatbik
edildiği kısımda aynı Rf değerde floresansı azaltan amarogentin
lekesi görülür. Kromatograma Echtrotsalz B reaktifi püskürtülüp 10
dakika beklendiğinde amarogentin lekesi turuncu renk alır. Amonyak
buhanna tutulunca ise kırmızı renge döner.
* Echtrotsalz B reaktifi: Diazoianmış 5-nitro-2 aminoanisol'un %0,5 lik
sulu çözeltisi.
213