Tanenlerin fotometrin miktar tayini - Ankara Üniversitesi Kitaplar ...

Belirteç: Çözücünün uçurulmasından sonra Anisaktehit-süffürik as»
reaktifi* püskürtülür, ardından 5-10 dak. 105- 110°C de ısıtılır, psitosterol
kırmızı-mor renkli leke olarak görülür.
Analiz çözeltisi: 5 mg p-sitosterol 0,5 ml etilasetatla çözülür.
Oleum Maydis embryonis'ten ft-sitasteml elda ariüfo
Prensip: Mısır yağındaki trigliseritler KOH ile sabunlaştirdir. Suda
çözünebilen bu sabunlaşma ürünlerinden suda çözünmeyen psitosterol
eterle ekstre edilerek aynbr ve etanolden kristallendirilir.
Deneyin yapılışı: 50 g Mısır yağı 500 ml'lik yuvarlak balona aktanlır ve
100 ml %20'lik etanollü KOH (20 g KOH 10 ml suda çözünür ve 90 ml
etanol ilave edilir) ile 3 saat geri çevirici soğutucuda kaynatılır. Daha
sonra rotavaporda kuruyuncaya kadar uçurulur, artık 500 ml distile suyla
hafifçe ısıtılarak alınır. Tekrar oda sıcaklığına kadar soğutulur (önemli)
ve 11t'lik ayırma hunisine aktanlır. Yuvarlak balon 2 defa 200'er ml eterle
çalkalanır ve eter ayırma hunisine aktanlır, çalkalanır. Meydana gelen
emülsiyon fazlan aynlıncaya kadar aseton (yaklaşık 30-50 rrd) ilave edilir
ve hafif hafif çalkalanır. Alt fazın (İ.T.K. I) tamamen ayrılmasından sonra
alt tabaka ikinci bir ayırma hunisine aktanlır ve 2 defa 150'şer ml eterle
çalkalanır. Meydana gelebilecek emülsiyon yukarıda açıklandığı gibi
asetonla bozulur. Bütün eter üst fazlan birleştirilir, 5 defa 200'şer ml su
ile çalkalanır, sonra susuz NaS04 ile kurutulur. Eter fazlan (İ.T.K. 2)
rotavaporda tamamen uçurulur hafif sanmsı bakiye önce 10 ml daha
sonra 5 ml etanolle (%95) çözülür ve çözeltiler birleştirilir. Daha sonra
bu çözelti +4°C'de bir gece buzdolabında saklanır. Meydana gelen kristaller
soğukta nııçe'den süzülür, buzdolabında soğutulmuş 1 ml etanolle
yıkanır ve vakumlu desikatorde kurutulur (İ.T.K. 3). Çözelti tekrar
uçurulup yukandaki işlem tekrarlanır (İ.T.K. 4).
•Anisatdehit-sütfürik asit reaktifi: 0,5 ml anisaldehit 10 ml glasiyal asetik
asit; 85 ml metanol ve 5 ml kons. sülfürik asit sıra He kanştmiarak
hazırlanır. Reaktif taze olarak hazırlanmalıdır. Kırmızı-mor renk teşekkül
ettiğinde reaktif atılmalıdır.
187