Tanenlerin fotometrin miktar tayini - Ankara Üniversitesi Kitaplar ...

ilave edilir. 60 saniye sonra 0,5 ml Tiyoüre reaktifi* ve 0,700 ml
Dinitrofenilhidrazin reakttfi* Have edilir. Kanşım 50°C de 75 dakika
süreyle çalkalıyarak karıştırılır, sonra buzlu suda 5 dakika tutulur. Daha
sonra buzlu su içinde damla damla 4 ml sülfürik asitli çözelti damlatılır
(50 ml konsantre sülfürik asit ve 12 ml su). Bu damlatma işlemi en az 90
saniye en çok 120 saniye devam etmelidir. 30 dakika sonra oda
sıcaklığında çözeltinin ekstinksiyonu bir santimetre kalınlığında küvette
ve 525 nm'de kör çözeltiye karşı ölçülür.
Kör çözelti: 2 ml süzüntü yukandaki gibi işleme tabi tutulur, sadece
dinitrofenilhidrazin ekstinksiyonun ölçülmesinden hemen önce ilave
edilir.
Mukayese çözeltisi: 0,0400 g askorbik asit 100 ml oksalik asit
çözeltisinde (%2 A/H) çözülür. Bunun 5 ml'si oksalik asit çözeltisiyle (%2
A/H) 100 ml'ye tamamlanır. Bu çözeltinin 2 ml'si yukandaki gibi işleme
tabi tutulur.
Hesaplama: 105°C de kurutulan Askorbik asit olarak hesaplanan askorbik
asit ve dehidroaskorbik asit
= Eı .10/E2 .T.(100-a)
Eı = Çözeltinin Ekstinksiyonu
E2 = Mukayese çözeltisinin ekstinksiyonu
* Dinitrofenilhidrazin reaktifi: 3 g 2,4-Dinitrofenilhidrazin 20 ml H2O ve 20
ml kons. H2SO4 çözeltisiyle soğukta çözülür. Çözelti su ile 100 ml'ye
seyreltilir ve süzülür.
* Tiyoüre reaktifi: 100,0 g Tiyoüre 900,0 g %50'lik etanolde çözülerek
hazırlanır.
25