Tanenlerin fotometrin miktar tayini - Ankara Üniversitesi Kitaplar ...

mevcut olduğundan, kellin'in İ.T.K.'si ile aynlması gereklidir.
Deneyin yapılıa;
Analiz çözeltisi: Toz edilmiş ve 2.0 g civannda tam olarak tartılmış drog
30 dakika süreyle geri çeviren soğutucuda 20 ml kloroformla ekstre
edilir. Ekstre daha sonra süzülür ve bakiye 3 defa 5'er ml kloroformla
yıkanır. Birleştirilen kloroformlu ekstreler su banyosunda kurutulur ve 4.0
ml kloroformda çözülür.
Test çözeltisi: 50 ml kellin 25.0 ml metanol'de çözülerek hazırlanır.
İ.T.K'si ile aynm ve miktar tayini: Bir ince tabaka kromatografisi plağı 6
kısma işaretlenerek ayrılır. 1.-3. kısımlara 0.02, 0.04 ve 0.06 ml test
çözeltisi, 4.-6. kısımlara ise yine 0.02,0.04 ve 0.06 ml analiz çözeltisi çizgi
şeklinde tatbik edilir. Plaka çözücü sistemi ile sürüklendikten sonra
çeker ocakta kurutulur. Sonra UV lambasıyla (254 nm) lekeler işaretlenir.
Plaka üzerindeki kellin lekeleri kazınarak alınır ve spatül ile iyice
ezip santrifüj tüplerine aktanlır. Her santrifüj tüpünün üzerine 6.0 ml 10
N H2SO4* ilave edilir. Müteakiben 5 dakika 60°C'de ısıtılır ve 30 dakika
sonra G4 nuçesinden süzülür. Bu çözeltilerin ekstinksiyonu 400 nm'de
kör değere karşı fotometrede ölçülür. Kör değer; test lekelerinin
üzerinde test lekeleri büyüklüğünde kieselgel lekesinin kazınıp alınması
ve yukanda açıklandığı şekilde sülfürik asitle muamelesiyle hazırlanır.
Hesaplama:
ıxg Analiz = EAnaliz. ^g Test/ eTest
% Kellin miktan = n.g.100/a.10 6.2
a: Tatbik edilen çözeltinin ml cinsinden miktarı.
* 10 N M2S0a-JfflKtifi- 21 ml %98'lik H2SO4 dikkatli olarak ve
soğutularak 79 ml su içine yavaş yavaş dökülerek hazırlanır.
109