Abschlussbericht

Antifoulingkonzepte für Sensoren für das Wassermonitoring durch sterisch
optimierte Tetraetherlipid-Coatings
PTKA-WTE
Die Durchführung war ähnlich wie bei den stationären Messungen. Die Proben wurden abzentrifugiert
und zu je 50 µl in eine 384-Well- Mikrotiterplatte gefüllt. Es wurden Proben aus dem Überstand nach
dem Zentrifugieren und aus zwei verschieden konzentrierten Aufschlämmungen des Pellets
vermessen. Die Anregungswellenlänge betrug 337 nm. Die Autofluoreszenz der Proben wurde bei
460/50 nm detektiert.
Fluoreszenz [rfu]
10000
1000
Überstand
5:1 Konzentrat des Pellet
14:1 Konzentrat des Pellet
PBS-Puffer
100
0 10 20 30 40 50
Zeit [ns]
Abb. 82: Zeitaufgelöste Fluoreszenzsignale der Autofluoreszenz einer natürlichen Wasserprobe
im Vergleich zum Hintergrundsignal von PBS-Puffer
Die Auswertung der Fluoreszenzabklingkurven erfolgte mit der numerischen Kurvenfit-Funktion des
Mikrotiterplattenreaders mit einem bi-exponentiellen Fit. Anschließend wurde aus den beiden
Einzelkomponenten die mittlere Fluoreszenzlebensdauer ausgerechnet:
Tab. 12: Fluoreszenzlebensdauer
mittlere Lebensdauer [ns] ± SD
Überstand 10,08 ± 0,13
Konzentrat 5:1 10,11 ± 0,21
Konzentrat 14:1 10,37 ± 0,03
Es ergaben sich nur geringfügige Unterschiede zwischen den Abklingkurven und den berechneten
mittleren Lebensdauern der Proben, die eine unterschiedliche Konzentration an Stoffwechsel-aktiven
Mikroorganismen aufweisen sollten.
In einem weiteren Arbeitsschritt wurden zeit- und spektralaufgelöste Fluoreszenzmessungen
durchgeführt. Verwendet wurde das Fluoreszenzspektrometer LF401 Lambda. Die
Fluoreszenzanregung erfolgte bei 337 nm. Die Fluoreszenzabklingkurven wurden zwischen 410 und
580 nm mit einer Schrittweite von 10 nm gemessen und analysiert.
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