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82 3 MATERIAL UND METHODEN
Anzucht der tiefgefrorenen Stämme auf Brolacin 24 h, 37 °C (Vorkultur)
Herstellung einer Keimsuspension in PBS-Lösung;
entsprechend McFarland Standard II
800 µl der Suspension in 200 ml Standard-I-Nährbouillon (Hauptkultur);
Horizontalschüttler 60 x/min, 37 °C, 24 h
dekadische
Verdünnung
Kühlschrank
+ 4 °C, 24 h
Berechnung des Keimgehaltes
vor der
Kühlung
nochmalige
Keimzahlbestimmung
Herstellung des
Inokulums
Infektion
Abb. 5:
Herstellung des Inokulums
Verabreichung und Dosierung
Anhand der errechneten Keimkonzentration der Hauptkultur wurden die Inokula so
eingestellt, dass die gewünschten Keimzahlen von 1 x 10 3 KbE/ Tier und
1 x 10 6 KbE/ Tier in 0,4 ml physiologischer Natriumchlorid-Lösung enthalten waren.
Bei der Keimzahl von 1 x 10 9 KBE/ Tier wurde ein Volumen verabreicht, wie es sich
aus der Hauptkultur ergab, das Volumen betrug zwischen 0,6 und 1,1 ml. Die
Kontrolltiere erhielten die äquivalente Menge an physiologischer Natriumchlorid-