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4 ERGEBNISSE 89
4 Ergebnisse
4.1 Markierung der Teststämme
4.1.1 Gewinnung Nalidixinsäure-resistenter Mutanten
Die für die Infektionsversuche zu testenden Salmonellen-Stämme wurden mit einer
Resistenz gegenüber dem Antibiotikum Nalidixinsäure markiert. Dieses machte den
Zusatz dieses Antibiotikums zu den Nährböden möglich. Hierdurch sollte das
Wachstum unerwünschter Begleitkeime aus der natürlichen Caecalflora unterdrückt
werden und die sichere Reisolierung der Salmonellen und damit eine quantitative
Auswertung der Proben möglich werden. Hierzu wurden die zwei S. Enteritidis-
Stämme, die für die weiterführenden Untersuchungen in Frage kamen (vgl. 4.2.1),
sowie alle fünf S. Typhimurium-Stämme - wie unter 3.2.4 beschrieben - mit einer
Nalidixinsäure-Resistenz markiert, die 100 mg Nalidixinsäure/l BPLS-Nähragar
erreichen sollte. Die Gewinnung Nalidixinsäure-resistenter Spontanmutanten gelang
bei allen verwendeten Stämmen. Bereits bei den unmarkierten Stämmen fiel auf,
dass der Durchmesser der Kolonien von S. Enteritidis nach 24-stündiger Bebrütung
geringer war als der von S. Typhimurium. Dieser Größenunterschied blieb auch bei
den resistenten Mutanten bestehen. Aufgrund der auf dem supplementierten BPLS-
Agar gewachsenen Anzahl an Kolonien und unter Berücksichtigung der
Ausgangskeimzahl konnten die in Tabelle 6 angegebenen Mutationshäufigkeiten der
verwendeten Stämme bestimmt werden (siehe auch 3.2.4, Abb. 3). Die
Nalidixinsäure-resistenten Mutanten wurden nachfolgend durch das hochgestellte
Suffix „r“ für resistent gekennzeichnet.
Zusätzlich wurde das Wachstum auf supplementiertem BPLS-Agar nach einer
zehnfachen Passage der Stämme auf unsupplementiertem Brolacin-Nährboden
überprüft. Auch nach diesen Passagen zeigten die Keime ein gutes Wachstum,
wobei die Resistenz gegenüber Nalidixinsäure erhalten blieb.