Regulationsmechanismen von Oxacillinresistenz und Biofilmbildung ...

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kann jedoch nur durch Zugabe von Ethanol in ihrer Fähigkeit zur Biofilmbildung rekonstituiert
werden. Weiterhin konnte für diesen inaktivierten Genort ein Einfluss auf die
Expression der Oxacillinresistenz in S. epidermidis 1057 M15 nachgewiesen werden 177 .
Als Insertionsstelle des Transposons Tn917 in diesen Klasse III Mutanten konnte das
Gen rsbU des σ B Operons identifiziert werden 148 , während für die Klasse II Mutante
S. epidermidis M12 ein offener Leserahmen mit hoher Homologie zu den purR Genen
von B. subtilis und S. aureus als Insertionsstelle nachgewiesen werden konnte 153 .
1.6 Fragestellung
Phänotypische Untersuchungen der Biofilm-negativen Mutante M15 des Wildtypstammes
S. epidermidis 1457 hatten gezeigt, dass eine Transposoninsertion in das Gen
rsbU des σ B Operons zu einer differentiellen Expression der Biofilmbildung führt 146, 148 .
Aufgrund dieser phänotypischen Beobachtung konnte jedoch noch keine Aussage
darüber getroffen werden, ob RsbU selbst als Regulator der Biofilmbildung fungiert,
oder ob die Regulation der Biofilmbildung über eine mögliche Regulation des
alternativen Sigmafaktors σ B vermittelt wird. Außerdem konnte nicht sicher ausgeschlossen
werden, dass die beobachteten Veränderungen lediglich auf polaren
Effekten der Transposoninsertion beruhten.
Zur Klärung dieser Fragen sollten im Rahmen dieser Doktorarbeit Mutanten von S. epidermidis
1457 generiert werden, bei denen gezielt die Einzelgene des σ B Operons
(rsbU, rsbV, rsbW und sigB), die regulative Kaskade (rsbUVW), sowie das gesamte
Operon (rsbUVWsigB) inaktiviert sind. Weiterhin sollte der Einfluss des σ B Operons auf
die Expression des für die Biofilmbildung essentiellen interzellulären Polysaccharidadhäsins
PIA evaluiert werden 171 . In diesem Zusammenhang sollte ebenfalls die
Regulation des icaADBC Lokus 106 , dessen Genprodukte für die PIA Synthese
verantwortlich sind, untersucht werden. Außerdem sollte der in der Biofilm-negativen
Mutante M12 inaktivierte Genort näher charakterisiert, sowie der Einfluss von
Regulatoren der Biofilmbildung auf die Expression der Oxacillinresistenz von S. epidermidis
untersucht werden. Durch die Aufklärung der Regulationswege der PIA
Expression sollten mögliche neue Zielstrukturen für verbesserte Therapie- und Verhütungsstrategien
Fremdkörper-assoziierter Infektionen ermittelt werden.