Regulationsmechanismen von Oxacillinresistenz und Biofilmbildung ...

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2 Material und Methoden 20 2 Material und Methoden 2.1 Material 2.1.1 Geräte Tabelle 2.1 Verwendete Geräte Hersteller Laborgerät AD Krauth, Hamburg, Deutschland GFL1083 Schüttelwasserbad Agfa Geavert AG, Leverkusen, Deutschland Crurix 2425 Entwickler Applied Biosystems, Foster City, USA ABI Prism 310 Sequencer B. Braun, Melsungen, Deutschland Lab-Shaker Schüttelinkubator Beckmann, München, Deutschland J2-21 Kühlzentrifuge Spectrophotometer 34 Behring, Marburg, Deutschland ELISA Processor II Spectrophotometer BioRad, München, Deutschland iCycler iQ Thermoycler Gene Pulser II Elektroporationssystem PowerPac 3000 Power Supply SmartSpec Plus Spectrophotometer Gelkammern Don Whitley Scientific Ltd., Shipley, England WASP Spiral Plater Dr. Gruß KG, Neuß am Rhein, Deutschland Inkubator F / 30 Eppendorf, Hamburg, Deutschland Eppendorfzentrifuge 5415 Thermomixer 5436 Mastercycler gradient Heinemann, Schwäbisch Gmünd, Deutschland Branson Sonifier 250-D Heraeus-Christ, Osterode, Deutschland Cryofuge 6-6 Kühlzentrifuge Megafuge 1.0 R Kühlzentrifuge Biofuge pico Tischzentrifuge Brutschrank 5050E Hettich, Tuttlingen, Deutschland Tischzentrifuge Rotana / S Knick, Berlin, Deutschland Digital-pH-Meter 646 Keutz Laborgeräte, Hamburg, Deutschland Gelkammern Leica, Bensheim, Deutschland TCS SP2 AOBS Leitz, Wetzlar, Deutschland Feinwaage 2432 Mettler Waagen GmbH, Gießen, Deutschland PC4400 Waage MWG Biotech, München, Deutschland Primus 96 Thermocycler Gelkammern Nettler-Hinz, Hamburg, Deutschland Thermoinkubator 5320 New Brunswick Scientific Co., New Brunswick, USA Pharmacia, Freiburg, Deutschland Phase, Lübeck, Deutschland Q-Biogene, Irvine, CA, USA Controlled Environment Incubator Schüttelinkubator Genequant GelCam Photodokumentationssystem FastPrep FP120
2 Material und Methoden 21 2.1.2 Chemikalien, Plastik- und Einwegartikel Bei den Chemikalien handelt es sich, soweit nicht anders angegeben, um analysenreine Substanzen der Firmen Fluka (Taufkirchen, Deutschland), Merck (Darmstadt, Deutschland), Roth (Karlsruhe, Deutschland) und Sigma (Taufkirchen, Deutschland). Plastik- und Einwegartikel stammen, wenn nicht anders angegeben, von den Firmen Eppendorf (Hamburg, Deutschland), Greiner (Nürtingen, Deutschland), Becton Dickenson (Cockeysville, MD, USA) und Nunc (Roskilde, Dänemark). 2.1.3 Puffer und Lösungen Alle Puffer und Lösungen wurden, sofern nicht anders angegeben, in vollentionisiertem (VE) Wasser angesetzt. EDTA-Lösung: Gelladepuffer (DNA): Gelladepuffer (RNA): 0,5 M Na-EDTA pH 7,5 0,25 % (wt/vol) Bromphenolblau 0,25 % (wt/vol) Xylen Cyanol FF 15 % (wt/vol) Ficoll 250 µl Formamid 83 µl Formaldehyd 37 % 50 µl 10 × MOPS 13 µl H 2 O 4 µl 1 % Bromphenolblaulösung jeweils frisch angesetzt 10 × MOPS: 200 mM Morpholinopropansulfonsäure 50 mM Natriumacetat 10 mM EDTA pH 7,0 Na-Acetat Lösung: PBS: SDS Stammlösung 3 M Na-Acetat pH 7,0 140 mM NaCl 9 mM Na 2 HPO 4 2 mM KCl 1 mM KH 2 PO 4 pH 7,4 20 % (wt/vol) Natrium-Dodecylsulfat 20 × SSC: 3 M NaCl 0,3 M Natriumcitrat pH 7,0
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