Regulationsmechanismen von Oxacillinresistenz und Biofilmbildung ...

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vität von icaR beobachtet wurde (Abbildung 3.25). Diese Daten weisen darauf hin, dass
die Regulation der Biofilmbildung durch die in der Mutante M12 inaktivierten Gene
barA und barB über eine positive Regulation der Transkription von icaADBC erfolgt,
welche jedoch von der Regulation durch den negativen Regulator IcaR unabhängig ist.
3.4 Expression der Oxacillinresistenz in den Deletionsmutanten
Die Arbeitsgruppe von Professor Mack hatte in den Vorarbeiten bereits eine Transduktante
der Mutante M15 in dem heterogen Oxacillin-resistenten S. epidermidis Isolat
1057 (1057 M15) etablieren können. Es konnte gezeigt werden, dass innerhalb der
Population dieser Transduktante eine im Vergleich zum Wildtyp kleinere Subpopulation
zur Expression der Oxacillinresistenz befähigt war 177 . Um zu untersuchen, ob das in der
Mutante M15 inaktivierte RsbU als selbständiger Regulator der Oxacillinresistenz
fungiert, wurde der Einfluss der Deletionen im σ B Operon auf die Expression der
Oxacillinresistenz evaluiert. Hierfür wurde der Expressionsphänotyp der einzelnen
Deletionsmutanten mittels Populationsanalyse mit dem Wildtyp S. epidermidis 1057
verglichen 122, 152 . Für den Wildtypstamm wurde die bereits bekannte heterogene
Expression der Oxacillinresistenz beobachtet, wobei bereits eine Oxacillinkonzentration
von 3 µg/ml zu einer mehr als hundertfachen Reduktion der kultivierbaren Bakterien
führte, während eine sehr kleine Subpopulation (circa 1:100.000) noch bei einer
Oxacillinkonzentration von 200 µg/ml wachsen konnte (Abbildung 3.26). Bei Mutanten
mit inaktivierter, beziehungsweise stark verminderter σ B -Aktivität konnte ebenfalls ein
heterogener Expressionsphänotyp beobachtet werden. Jedoch war die resistente Subpopulation
bei geringen Oxacillinkonzentrationen (3 – 50 µg/ml Oxacillin) gegenüber
dem Wildtyp circa um den Faktor fünf bis zehn verringert, während die gegenüber
200 µg/ml Oxacillin resistente Subpopulation wiederum mit dem Wildtyp vergleichbar
war. Interessanterweise konnte bei Mutanten mit Inaktivierung von RsbW bei intaktem
sigB Gen ein Wechsel des Expressionsmusters von einer heterogenen zu einer homogenen
Expression der Oxacillinresistenz detektiert werden. Hierbei waren circa 90 %
der Gesamtpopulation resistent gegenüber Oxacillinkonzentrationen von mindestens
50 µg/ml. Somit konnte gezeigt werden, dass der alternative Sigmafaktor σ B einen maßgeblichen
Einfluss auf die Expression der Oxacillinresistenz in S. epidermidis 1057
ausübt.